白头翁皂苷D是从清热解毒中药白头翁中分离出来的一种皂苷类成分,具有较强的抗肿瘤活性,由于其溶解度小,溶血性较强,严重影响了其成药性。本论文将中药抗肿瘤活性成分白头翁皂苷D制备成白蛋白纳米粒,旨在解决白头翁皂苷D溶解度低、溶血性强两个成药性的问题,并对该制剂的制备处方工艺、质量评价、溶血特性试验及药动学实验进行了初步研究,具体研究内容及结论分述如下:1.采用高效液相法进行了白头翁皂苷D含量方法的研究。测定了白头翁皂苷D在不同浓度乙醇中溶解度。进行了光、湿、热因素对白头翁皂苷D影响的考察。考察了空白白蛋白纳米粒制备的相关影响因素。经方法学考察白头翁皂苷D含量测定方法准确、有效、可靠。不同乙醇浓度中白头翁皂苷D的溶解度大小测定结果表明随着溶剂的非极性增强,其溶解度增大,为后续制剂原料溶剂的合理选择提供了依据。高湿实验中表明白头翁皂苷D具有一定的吸湿性,且具有一定的挥发性,应注意密封保存。空白白蛋白纳米粒的影响因素的考察结果反应了离子强度和p H等均对纳米粒的粒径大小和分布存在一定的影响,为后续制剂制备奠定了基础,降低了后续制剂研究的风险,提高了实验的成功率。2.采用高效液相色谱法进行了白头翁皂苷D白蛋白纳米粒中白头翁皂苷D的含量测定研究。采用去溶剂法制备了白头翁皂苷D白蛋白纳米粒,采用单因素实验考察了载药纳米粒的处方和制备工艺。通过Box-Behnken实验设计及效应面优化了白头翁皂苷D白蛋白纳米粒制备。经方法学考察建立的HPLC法测定白头翁皂苷D白蛋白纳米粒中白头翁皂苷D的含量测定方法简便、准确可行,可用于测定白蛋白纳米粒的载药量和包封率,为后续制备处方和工艺优化及制剂的质量评价与控制奠定了基础。单因素实验考察了相关处方和工艺因素对载药纳米粒的影响,筛选出白蛋白用量、有机相用量、投药量,通过优化确定最佳制备条件为白蛋白用量为100 mg,有机相用量1 m L,白头翁皂苷D用量为22.78 mg。3.对最优处方制备的白头翁皂苷D白蛋白纳米粒样品进行表征及质量评价研究。通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察白头翁皂苷D白蛋白纳米粒的形貌,采用马尔文激光粒度仪测定白头翁皂苷D白蛋白纳米粒的粒径及粒度分布。采用高效液相法测定了白头翁皂苷D白蛋白纳米粒的载药量和包封率。利用红外光谱与X-粉末衍射对纳米粒进行分析,表征了纳米粒的形成。采用摇床法测定了纳米粒在水中的溶解度,采用动态透析法测定了纳米粒在体外释放行为,采用酶标仪评价纳米粒的溶血性,并对初步稳定性进行了考察。经电镜观察白蛋白纳米粒形态圆整、分散性好,粒径分布均匀。载药量和包封率分别为17.5%、94.5%。红外光谱测定分析和X-粉末衍射分析结果表明,白蛋白纳米粒无明显的药物结晶特征,药物主要是被包封于载体材料中。白头翁皂苷D制成白蛋白纳米粒之后,较原料药溶血现象降低,较原料药溶解度增大。白头翁皂苷D白蛋白纳米粒在2小时内无突释效应,且具有缓释作用。4.白头翁皂苷D白蛋白纳米粒的药动学初步研究。建立了LC-MS/MS分析方法来测定大鼠生物样品中的白头翁皂苷D,检测了白头翁皂苷D白蛋白纳米粒尾静脉注射给药不同剂量在不同时间点的血药浓度,利用DAS 2.0软件进行数据拟合分析。LC-MS/MS定量检测方法符合生物样品分析指导原则,该方法分析时间在2.5 min以内,线性范围为10～1 500 ng/m L,样品处理方法简单,专属性好。白头翁皂苷D白蛋白纳米粒T_1/2比原料药的时间更长,且MRT比原料药时间长,说明研制成制剂后有缓释作用。由AUC可以看出制剂是5倍的原料药,说明制剂比原料药相对利用更高。