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1.目的:
本研究通过对新研制的用于引导牙周组织再生的可降解引导组织再生膜(GTMm)材料——仿生型改性胶原膜的理化性能及其与人牙周韧带细胞(PDLCs)的生物相容性进行初步探讨，为今后临床应用提供实验依据。
2.方法:
2.1仿生型改性胶原膜的理化性能检测
肉眼观察材料表面结构，扫描电镜观察和分析材料致密层及疏松层孔隙分布，孔径大小。对材料的抗撕强度、膨胀率、弹性膜量、PH值、体外酶降解实验、体外酶降解实验产物氨基酸测定等理化性能进行初步检测。
2.2仿生型改性胶原膜的生物相容性研究
2.2.1采用组织块法培养人PDLCs。
采用组织块法培养人PDLCs。免疫组化ABC法染色鉴定细胞来源。光镜下进行细胞形态学观察，MTT法绘制第4代人PDLCs生长曲线。
2.2.2仿生型改性胶原膜的细胞毒性研究
通过MTT法检测材料浸提液培养人PDLCs的细胞相对增殖度，对实验材料的细胞毒性作出可靠定量评价。
2.2.3仿生型改性胶原膜的细胞相容性研究
采用二维接触培养法，观察人PDLCs在膜材料上的粘附与散布，从不同角度对实验材料的体外细胞相容性进行评价。
2.2.4仿生型改性胶原膜对人PDLCs分泌功能影响
采用人PDLCs与膜材料接触培养，对细胞培养上清液中羟脯氨酸(Hydroxyproline，HYP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，ALP)及骨钙素(Osteocalcin，OC)含量进行定量测定，检测材料对细胞分泌功能的影响。
3.结果:
3.1仿生型改性胶原膜的理化性能
1)仿生型改性胶原膜呈半透明双层结构，色泽白或微黄，有较强的柔软度。致密层质地均匀，表面光滑；疏松层结构疏松，呈海绵样多孔状。
2)扫描电镜下见材料致密层表面光滑，结构致密，无孔径；疏松层结构疏松，胶原纤维交织成立体网状结构，孔隙分布均匀，深浅不一，孔径大小(115.4±25.8)μm。
3)实验材料抗撕强度(3304.11±4.33)g/cm3弹性膜量(156.47±7.67)g/m㎡；膨胀率3.529±0.108；PH值7.23±0.04；体外抗酶降解能力14d；降解产物中甘氨酸含量16.21％最为丰富，不含色氨酸，符合胶原特性。
3.2仿生型改性胶原膜的生物相容性
3.2.1组织块法培养人PDLCs组织块法培养人PDLCs并传代成功率42.42％。波形丝蛋白(Vimentin，VIM)染色阳性，细胞角蛋白(Cytokeratin，CK)染色阴性。细胞呈长梭形，核仁清晰，排列均匀。生长曲线示细胞第3天进入对数生长期。
3.2.1 MTT结果
材料7种浓度不同时期毒性分级均在0～1级之间，对人PDLCs无毒性。高浓度材料浸提液对细胞生长影响与低浓度相比并不存在显著性差异(P>0.05)；随着培养时间延长各实验组细胞数量都明显增加，各浓度组细胞增殖数OD值与对照组相比无明显差异(P>0.05)。
3.2.3二维接触培养法细胞培养结果
人PDLCs紧密附着于材料疏松面，贴附生长，相邻细胞胞体相连，细胞生长密集处可见细胞堆积复层生长。
3.2.4人PDLCs分泌功能
实验组上清液HYP、ALP和OC含量测定值高于对照组，两者间具有统计学差异(P<0.05)，材料对细胞分泌胶原、ALP及OC功能无抑制。
4.结论:
4.1仿生型改性胶原膜为具有双层不同结构的生物膜，其致密层纤维排列致密，具备阻挡成纤维细胞通透的作用：疏松层结构疏松，孔隙较多，具备维持血凝块及利于细胞与膜结合的作用。材料具有良好机械性能和空间维持能力；较好的抗酶降解能力；膜降解产物对人体无毒副作用。
4.2仿生型改性胶原膜对人PDLCs无毒性作用，人PDLCs在膜上能维持其形态学特征及生物学特性，符合医用生物材料的安全要求。仿生型改性胶原膜具有良好的生物相容性，可望进一步应用于引导牙周组织再生研究。