论文部分内容阅读
随着现代养殖的规模化与集约化,合理使用兽用抗生素受到人们广泛关注。在养鸡业中抗生素滥用情况严重,特别是第三代头孢菌素的大量使用,导致鸡源产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌耐药现状日益严峻,制约了兽医临床用药,通过食品动物危害人类健康。因此研究鸡源产ESBLs大肠杆菌耐药性并探讨其公共卫生意义尤为重要。本试验从吉林省长春市周边10家不同规模养鸡场采集的200份鸡粪样品中分离鉴定出115株不同的产ESBLs大肠杆菌,选择β-内酰胺类、氨基糖苷类等22种抗生素研究分离菌的耐药表型与多重耐药菌株存在情况,结合不同规模养殖场调查现状进行分析。结果表明,其生产管理水平越差、抗生素使用情况越严重,养殖场鸡粪样品中产ESBLs大肠杆菌检出率越高。分离菌对氨苄西林、头孢唑林、头孢曲松完全耐药,对呋喃妥因、美罗培南均敏感,对头孢噻肟、氨曲南、阿莫西林、环丙沙星、恩诺沙星、四环素、氟苯尼考、复方新诺明耐药率均在50%以上,对左氧氟沙星、庆大霉素、多西环素、林可霉素耐药率在20%50%之间,对阿米卡星、阿奇霉素、多粘菌素E、万古霉素、磷霉素仍然保持较好的抗菌活性,耐药率低于20%,其中多重耐药菌株占97.4%,最高为20耐。在分离的115株鸡粪产ESBLs大肠杆菌中,经接合转移试验共筛选出30株接合子,测定供体菌、接合子、受体菌对15种药物的最小抑菌浓度,以对比质粒接合转移试验后耐药表型的变化,通过PCR技术检测接合子质粒中blaCTX-M、blaTEM、blaSHV、blaOXA、NDM-1、qnr-A、mcr-1、sulI、tet-M型耐药基因及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶携带情况。结果显示,接合转移试验后对氨苄西林、头孢唑啉、阿莫西林、头孢噻肟和复方新诺明的耐药性转移率高达100%且全部耐药,环丙沙星为83.3%,头孢曲松和氯霉素为66.7%,庆大霉素和妥布霉素为63.3%,头孢西丁为53.3%,多粘菌素B和多粘菌素E为43.3%,阿米卡星为40%,所有接合子均对美罗培南敏感。接合子耐药基因检出率分别为blaCTX-M(100%)、blaTEM(80%)、blaSHV(30%)、blaOXA(0%)、NDM-1(0%)、qnr-A(76.7%)、mcr-1(13.3%)、sulI(33.3%)、tet-M(0%),尤其4株产ESBLs大肠杆菌携带mcr-1耐药基因的质粒发生了水平转移。接合质粒中以CTX-M+TEM+qnr-A耐药模式最高(23.3%)。Ⅰ类整合酶基因广泛存在于接合子质粒中,检出率为76.7%,Ⅱ类、Ⅲ类整合酶基因均未检出。