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目的:
应用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(Matrix-assisted LaserDesorption/Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry, MALDI-TOF MS)蛋白提取法和hisA基因测序快速鉴定伯克霍尔德菌群，旨在建立快速准确的鉴定方法。并对临床分离的伯克霍尔德菌群进行分子分型。
方法:
收集117株临床分离的伯克霍尔德菌群，将菌种接种于哥伦比亚血平板和中国兰平板，37℃孵育，挑取菌落采用MALDI-TOF MS蛋白提取法快速鉴定细菌;提取基因组DNA，采用hisA基因测序方法对其进行分子分群，同时以16S rRNA基因测序方法为标准，对两方法进行比较。
结果:
hisA基因测序鉴定结果:94株新洋葱伯克霍尔德菌(Burkhoderia cencepacia，GⅢ型)，11株多嗜伯克霍尔德菌（B.multivorans，GⅡ型），9株洋葱伯克霍尔德菌（B.cepacia，GⅠ型），3株越南伯克霍尔德茵（B.vietnamiensisGⅤ）。与hisA基因测序相比，16S rRNA基因测序结果9株洋葱伯克霍尔德菌不能与稳定伯克霍尔德菌（B.stabilis，GⅣ）区别，其余鉴定结果与其一致，符合率92.3％。MALDI-TOFMS鉴定分数均值2.173，1株结果不可信（分值＜1.700），21株鉴定到属(分值1.700-2.000)，29已鉴定至属，有可能鉴定到种（分值2.000-2.300），56株可以鉴定到种。117株洋葱伯克霍尔德菌群MALDI-TOF MS蛋白提取法鉴定结果同hisA基因测序结果均符合，鉴定符合率100％。临床菌株分离率新洋葱伯克霍尔德菌（GⅢ型）占80.3％(94/117)，多嗜伯克霍尔德菌（GⅡ型）占9.4％，洋葱伯克霍尔德菌(GⅠ型)占7.7％，越南伯克霍尔德菌（GⅤ型）占2.6％(3/117)。
结论:
1、使用Vitek2 compact全自动细菌鉴定仪鉴定伯克霍尔德菌菌群时，不能有效将各种基因型分离开来，但其鉴定耗时较短。16s rRNA基因测序鉴定伯克霍尔德菌也只能区分一部分基因型，不能全部鉴定到种，并且这种方法花费3天左右才能完成。
2，使用HisA基因测序的方法鉴定伯克霍尔德菌菌群时，鉴定结果准确。本实验中，hisA基因测序的方法将伯克霍尔德菌菌群区分为四个基因型。但这种方法与16srRNA基因测序一样花费时间较长。
3，MALDI-TOF MS鉴定细菌准确，与hisA基因测序结果一致。由于其操作时间短，高通量的特点，适合临床实验室使用。
4，用生成树状图分析菌种亲缘关系远近时，使用HisA基因测序结果分析较使用MALDI-TOF MS准确。