1目的:旨在掌握我国东北黑龙江牡丹江、华中河南三门峡、华东福建武夷山和华南广西凭祥这四个地区的自然风景区的蜱以及鼠形动物、鸟等宿主动物体内伯氏疏螺旋体、斑点热群立克次体、嗜吞噬细胞无形体及巴贝西原虫这四种病原体的感染及复合感染情况,选取了牡丹江镜泊湖、三门峡甘山国家森林公园、武夷山风景区及凭祥友谊关这四个自然风景区,分析上述自然风景区蜱媒传染病感染的风险,为该自然风景区做好科学合理且经济有效的蜱媒传染病的防控工作提供基础的理论支持,以便能够做到对自然风景区蜱媒传染病的早期预警。2方法:采用人工布旗法在调查地区草丛或林中捕捉游离蜱;在哺乳动物如牛、羊、犬等体表采集寄生蜱;采用夹夜法捕获鼠形动物,取其膀胱、脾等组织;用网捕法捕获鸟类,取其血液、肝脏等组织。将标本带回实验室分类鉴定后提取DNA,采用PCR或Nested-PCR法扩增基因片断,然后进行琼脂糖凝胶电泳及凝胶成像系统观察结果,以判定标本感染病原体情况,随机选取阳性标本进行测序和序列分析。应用c2检验或Fisher确切概率法进行统计分析,判定采集地区四种病原体的感染情况,并采用软件MEGA5.0构建系统发育树分析序列,确定病原体的分类学位置。3结果:检测牡丹江镜泊湖地区2012年和2013年采集到嗜群血蜱781只,全沟硬蜱70只,日本血蜱52只,对全部蜱标本进行四种病原体检测发现:(1)伯氏疏螺旋体阳性标本12只,感染率为1.33%。全沟硬蜱、嗜群血蜱、日本血蜱的感染率分别为15.71%、0.17%、0.00%,经统计学分析,三个蜱种之间伯氏疏螺旋体的感染率有统计学差异(c2=50.03,P<0.05)。经测序比对分析发现,牡丹江镜泊湖检测的阳性蜱标本中,伯氏疏螺旋体属于B.afzelii型和B.garinii型。(2)斑点热群立克次体阳性标本57只,感染率6.31%。全沟硬蜱、嗜群血蜱和日本血蜱的感染率分别为35.71%、3.97%、1.92%,经统计学分析,三个蜱种之间斑点热群立克次体的感染率有统计学差异(c2=63.29,P<0.05)。经测序比对分析发现,牡丹江镜泊湖检测的阳性蜱标本中,斑点热群立克次体属于Rickettsia heilongjiangii、Rickettsia raoultii、Candidatus Rickettsia tarasevichiae和一种未知的斑点热群立克次体。(3)嗜吞噬细胞无形体阳性标本2只,感染率0.22%,感染嗜吞噬细胞无形体的的蜱标本均为全沟硬蜱。各蜱种间感染率无明显差异(c2=5.04,P﹥0.05)。经测序比对发现,牡丹江镜泊湖检测的的阳性蜱标本中,嗜吞噬细胞无形体与中俄边境菌株及中国东北菌株距离最近。(4)巴贝西原虫阳性标本2只,阳性感染率为0.22%,感染巴贝西原虫的的蜱标本均为全沟硬蜱。各蜱种间感染率无明显差异(c2=5.04,P﹥0.05)。经测序比对发现,牡丹江镜泊湖检测的阳性蜱标本中,巴贝西原虫属于Babesia microti。此外,在牡丹江镜泊湖检测的全沟硬蜱标本中,存在伯氏疏螺旋体和嗜吞噬细胞无形体、伯氏疏螺旋体和巴贝西原虫及伯氏疏螺旋体和斑点热群立克次体的复合感染情况。牡丹江镜泊湖附近捕获的12只鼠形动物中未检测到四种病原体。河南三门峡甘山附近采集的248只长角血蜱中,检测到斑点热群立克次体阳性标本1只,感染率为0.40%,经测序比对发现,检测的阳性蜱标本中的斑点热群立克次体与Rickettsia sp.(福建、河北、韩国等分离菌株)在同一分支,同源性最近。广西凭祥友谊关附近采集到的161只具角血蜱中未检测到上述四种病原体的存在;在该地区捕获的53只鼠形动物中,检测到3只鼠形动物感染了伯氏疏螺旋体,感染率5.66%,经测序比对发现,检测的阳性标本中,伯氏疏螺旋体属于B.valaisiana。福建武夷山附近采集31只寄生蜱中均未检测到上述四种病原体的存在。4结论:本课题对上述四个自然风景区内蜱及鼠形动物、鸟标本中四种重要的蜱媒传染病的病原体进行了初步的研究和探讨。牡丹江镜泊湖的蜱标本中检测到了伯氏疏螺旋体、斑点热群立克次体、嗜吞噬细胞无形体及巴贝西原虫四种病原体的感染,而且全沟硬蜱感染了上述四种病原体,在全沟硬蜱中还存在复合感染的情况;河南三门峡甘山森林公园的蜱标本中检测出了斑点热群立克次体的感染;广西凭祥友谊关的鼠形动物标本中检测出了伯氏疏螺旋体的感染。本研究为我国自然风景区的蜱媒传染病的深入研究奠定了基础,自然风景区内蜱及蜱媒传染病的防控工作应该引起公共卫生机构的重视。