蓝藻抗病毒蛋白N (Cyanovirin-N, CV-N)是Boyd等1997年在蓝藻中发现的一种抗病毒蛋白,对流感病毒、埃博拉病毒、单纯疱疹病毒、肝炎病毒等都有拮抗作用,是一种作用广谱、高效、非常有应用价值的抗病毒候选药物。首先,重组CV-N蛋白已经在原核和真核系统中获得表达,但因为该蛋白分子量较小及原核来源,常常导致其表达量低及易形成包涵体,难以满足其大规模供应的需求。为了提高L-CVN的表达量,本文在摇瓶及发酵罐的基础上,重点研究了重组质粒稳定性,质粒拷贝数等相关因素,优化了中试规模发酵条件,提高了L-CVN的表达量,其最高可溶目的蛋白表达量达40%以上。纯化制备了L-CVN及其衍生物mPEG10K-ALD-LCVN。再者,从急性毒性方面对L-CVN及其衍生物mPEG10K-ALD-LCVN的安全性做出初步评价,结果表明L-CVN及mPEG10K-ALD-LCVN的最小致死剂量大于200 mg/kg,在此剂量范围内,两种蛋白无明显的毒副作用。进一步比较了L-CVN及nPEG10K-ALD-LCVN在小鼠体内免疫原性强弱。结果显示两种抗原均会产生抗体,但mPEG10K-ALD-LCVN具有比L-CVN更低的免疫原性。这一结果表明我们获得了更低免疫原性的L-CVN衍生物。最后,利用重组L-CVN为抗原,制备了L-CVN多克隆抗体,为进一步的药代动力学实验做准备。多抗血清经两步纯化后获得效价为1：6400高纯度纯化抗体,经HRP修饰后获得具有较高生物活性的标记抗体。