基于液相色谱-质谱联用技术的早期胃癌血液代谢组学研究

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应用液相色谱质谱联用技术(LC-MS)对进展期胃癌、早期胃癌和健康人的血液样本进行分析,得出进展期胃癌、早期胃癌、健康人血清样本代谢物代谢谱,找出差异代谢产物。并尝试检验这些标记物对区分胃癌和健康人、早期胃癌和健康人的准确性,为寻找早期胃癌新的生物标志物提供科学依据。方法:1、样本处理:样本采集后14000r/min离心5min,取上清液供LC-MS分析。2、LC-MS分析:通过液相色谱-质谱仪对血清样本进行检测,得到进展期胃癌、早期胃癌和健康人的血液样本代谢图谱和相关原始数据。3、数据处理:采用方差分析、主成分分析、偏最小二乘判别分析、聚类分析等统计方法进行分析,分析胃癌患者和健康人、早期胃癌和健康人的差异代谢产物,绘制ROC曲线验证这些产物对于区分各组的准确性。4、验证组验证:设立独立样本作为验证组,用几种差异代谢物对验证组进行验证、分组和准确性的判断。结果:1、在正负两种离子模式下,得到进展期胃癌、早期胃癌和健康人样本的总离子流程图,可看到各组之间存在峰度值差异;2、通过方差分析,共筛选出316个具有统计学意义的代谢物;主成分分析得分图可以看到各组可以很好的区分开;3、用偏最小二乘判别分析和支持向量机判别分析共得出4个重要差异代谢物;4、绘制ROC曲线显示4种代谢物的面积值均大于0.8,即有较高的准确性。制作含量柱状图可以看出4个代谢物在各组之间存在含量差异。5、以这4种差异代谢物为分组依据对独立样本进行分组,结果显示对进展期胃癌、早期胃癌和健康人具有很好的区分能力。结论:1、精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油在胃癌和健康人之间存在代谢组学差异,可能为潜在生物标记物;2、精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油在早期胃癌与健康人之间存在代谢组学差异,可能为潜在生物标记物;3、精胺、肠抑素、三酰甘油在肿瘤发展中呈降低趋势;硫酸肝素在肿瘤发展中呈先降低后升高的趋势,代谢物的含量变化可能与肿瘤发生发展有关,并可继续探究其代谢机制。
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