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背景三基序蛋白TRIM22(tripartite motif 22),也被称为Staf50(stimulated trans-acting factor of 50 kD),因其具有包含RING区,B-box区和卷曲螺旋区的RBCC结构序列,而被归于三基序蛋白TRIM家族中的一员。TRIM22是抑癌基因P53的靶基因之一,其过表达可以激活NF-κB,并且N端RING结构域及C端SPRY结构域对其在NF-κB活动,抗病毒以及自身免疫疾病中的介导过程十分重要。已有研究证明TRIM22呈现RING结构域依赖性E3泛素连接酶活性,可参与病毒复制的抑制,具有抗肿瘤增殖作用,但其特定分子功能尚未阐明。真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E,简称“eIF4E”)是一种帽结合蛋白,可以特异性地识别mRNA的5’端的帽子结构,从而启动翻译。eIF4E过度表达会导致增加扩散,逃避凋亡,肿瘤侵袭和转移。血液肿瘤中,eIF4E高表达在急性淋巴系统白血病中较少发生,在淋巴瘤,骨髓增生异常综合症,急慢性髓系白血病(尤其是M4,M5亚型和慢性髓系白血病急变期的患者)中较多见,对eIF4E基因表达水平的检测对监测AML疾病状况有重要意义。课题组前期发现在全反式维甲酸(all-trans-Retinoic acid,ATRA)诱导急性髓系白血病细胞粒系分化过程中TRIM22与eIF4E呈反向变化。TRIM19已被证明依赖RING结构域通过与eIF4E结合来抑制其活动,那么我们推测有相似结构的TRIM22也可能有相似作用,并有望成为急性髓系白血病治疗的新靶点。目的探讨在人急性髓系白血病细胞粒系分化过程中TRIM22的功能及与eIF4E的相互作用,从而进一步阐明TRIM22靶向调控eIF4E的机制,为白血病治疗寻找新靶点提供重要依据。方法体外实验建立ATRA诱导HL-60及NB4细胞分化模型,应用RT-PCR,q-PCR及Western Blotting技术检测TRIM22与e IF4E的基因与蛋白表达的变化,并通过电穿孔转染技术敲低或过表达TRIM22后,利用CCK-8和流式细胞术检测其对细胞功能的影响,以及Western Blotting技术检测对eIF4E蛋白表达水平的影响。最后采用免疫共沉淀实验(CO-IP)验证TRIM22与eIF4E的相互作用。结果ATRA诱导HL-60及NB4细胞后,TRIM22的基因及蛋白表达水平均升高,eIF4E的基因及蛋白表达水平均降低。其中q-PCR检测NB4细胞在诱导前后mRNA相对表达量由1.01±0.15逐渐升高到30.98±2.79(F=280.70,P=0.000),Western blotting检测其蛋白相对表达水平由0.22±0.03逐渐升高至0.51±0.05(F=51.43,P=0.000)。反之,eIF4E的mRNA相对表达量由1.01±0.09逐渐降低至0.47±0.06(F=20.52,P=0.000),蛋白相对表达水平由0.97±0.02逐渐降低至0.64±0.09(F=14.70,P=0.001)。流式细胞术检测TRIM22过表达后ATRA干预组(78.8±2.0)%比空载体ATRA干预组(58.7±2.7)%的PE-CD11b表达水平高(t=9.54,P=0.000);共转染后ATRA干预组(61.6±3.8)%比TRIM22过表达后ATRA干预组PE-CD11b表达水平(78.8±2.0)%低(t=8.19,P=0.000)。过表达TRIM22组的NB4细胞72h后增殖抑制率(0.25±0.01)%高于空载体组(0.03±0.02)%(t=15.47,P=0.000)。同时,过表达TRIM22基因水平后,eIF4E蛋白水平会降低(t=4.99,P=0.007)。CO-IP实验验证TRIM22通过结合eIF4E而作用。结论在ATRA诱导HL-60,NB4细胞粒系分化过程中,TRIM22的mRNA及蛋白表达水平逐渐升高,而eIF4E的mRNA及蛋白表达水平逐渐降低。TRIM22在NB4细胞粒系定向分化过程中可抑制细胞增殖并促进其在ATRA作用下的细胞分化,并且可通过靶向结合eIF4E抑制其表达而发挥重要作用。