化瘀通络中药对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对肾脏α平滑肌肌动蛋白表达的影响

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目的:糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)泛指由于糖尿病导致的肾小球病变,是糖尿病发展到一定阶段出现的严重并发症。本实验通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DN大鼠模型,予化瘀通络中药进行干预,通过观察大鼠一般情况、肾脏组织形态学变化,以及检测24小时尿蛋白定量、血生化指标、α-SMA表达水平等,研究化瘀通络中药的作用,并探讨其可能的作用机制。  方法:健康雄性SD大鼠50只,适应性饲养一周,随机选10只做为正常对照组(C),剩余大鼠禁食12小时以上,一次性腹腔注射STZ55mg/kg,72小时后尾静脉测随机血糖>16.7mmol/L为造模成功。成模大鼠随机分为模型组(M)、中药组(Z)、西药组(X),相应中药及西药厄贝沙坦灌胃16周。于第16周末收集大鼠24小时尿液。禁食12小时以上,动物麻醉状态下取血检测血液指标,并留取肾组织进行光镜、电镜、免疫组化检查。  结果:  1.实验大鼠的一般情况正常对照组大鼠一般情况良好;其它大鼠在注射STZ成模后,均出现典型的三多一少症状,且以模型组最为显著;各给药组大鼠在治疗过程中症状均有不同程度的缓解。治疗期间中药组死亡1只,西药组死亡2只,模型组死亡6只。  2.24小时尿蛋白定量(24h UTP)结果显示:两治疗组24小时尿蛋白定量水平与正常对照组及模型组均有差异(P<0.05),比正常对照组明显升高,比模型组明显降低;中药组和西药组之间无明显差异(P>0.05)。  3.血液指标检测结果结果显示:造模各组大鼠与正常对照组相比FPG水平明显升高(P<0.05),模型组、中药组、西药组之间大鼠FPG水平无统计学差异(P>0.05);造模各组大鼠与正常对照组相比TG水平明显升高(P<0.05),中药组与西药组较模型组TG水平明显降低(P<0.05),两治疗组无统计学差异;造模各组与正常对照组相比ALB水平明显降低(P<0.05),中药组与西药组ALB水平比模型组明显升高(P<0.05),两治疗组之间无统计学差异(P>0.05);各组大鼠Scr水平无统计学差异(P>0.05)。  4.肾组织形态学观察  4.1 光镜观察正常对照组大鼠肾组织结构清晰正常;模型组大鼠肾小球肥大,肾小囊呈裂隙状,甚至出现球囊粘连,基底膜明显增厚,系膜基质增生;与模型组相比,两治疗组病理改变明显减轻。  4.2 电镜观察正常对照组大鼠肾组织结构清晰正常;模型组大鼠肾小球毛细血管基底膜均质性增厚,系膜基质增多,足细胞足突广泛融合;与模型组比较,两治疗组病理改变明显减轻。  5.免疫组织化学法检测肾组织的α-SMA表达结果显示:正常对照组大鼠除肾血管平滑肌阳性表达外,肾小管上皮细胞和肾间质未见明显表达;与正常对照组相比,模型组在肾小管上皮细胞内、肾间质均可见明显的阳性表达(P<0.05);与模型组比较,中药组与西药组表达明显减弱(P<0.05),中药组和西药组比较无统计学差异(P>0.05)。  结论:  1.化瘀通络中药能改善DN大鼠的一般情况,减少蛋白尿,维持血浆蛋白含量,减轻DN病理表现,并能降低血浆甘油三酯水平,改善糖尿病脂质代谢紊乱,这些方面的作用与厄贝沙坦相似;本实验所采用的中药和西药对糖代谢均无明显作用。  2.糖尿病肾病大鼠的肾脏α-SMA高表达。化瘀通络中药和厄贝沙坦均能降低糖尿病肾病大鼠肾脏α-SMA表达水平,提示其对DN的治疗作用可能与其抑制肾小管上皮细胞和肾间质细胞发生表型转化,减轻肾脏纤维化程度有关。  
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