【摘 要】
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研究目的:比较有氧运动和/或姜黄素干预对于改善长期高脂饮食造成的肠道菌群紊乱的作用效果,为调节、改善高脂饮食诱发的肠道菌群紊乱提供理论支持。研究方法:40只5周龄雄性SD大鼠,经7天适应性饲养后,使用随机数字法对40只大鼠按照体重进行分组,分为普通膳食+安静组(C组)、高脂膳食+安静组(H组)、高脂膳食+姜黄素+安静组(J组)、高脂膳食+有氧运动组(S组)和高脂膳食+姜黄素+有氧运动组(U组)。各
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研究目的:比较有氧运动和/或姜黄素干预对于改善长期高脂饮食造成的肠道菌群紊乱的作用效果,为调节、改善高脂饮食诱发的肠道菌群紊乱提供理论支持。研究方法:40只5周龄雄性SD大鼠,经7天适应性饲养后,使用随机数字法对40只大鼠按照体重进行分组,分为普通膳食+安静组(C组)、高脂膳食+安静组(H组)、高脂膳食+姜黄素+安静组(J组)、高脂膳食+有氧运动组(S组)和高脂膳食+姜黄素+有氧运动组(U组)。各组大鼠采用自由摄食饮水的方法饲养,C组普通饲料喂养;H组、J组、S组、U组以高脂饲料(60%高脂热量比饲料)喂养。J组、U组实验第3周起根据前期研究结果确定灌胃姜黄素(0.5%CMC-Na作为助悬剂,配制成姜黄素混悬液储存于4℃冰箱备用)剂量为200 mg/(kg·d)、体积为5 mL/kg,每次训练前0.5小时以该剂量给予灌胃,每天1次,其余各组均以等体积0.5%羧甲基纤维素钠灌胃,灌胃6周。S组、U组自第3周起进行有氧运动干预。运动方案为:坡度:5°,运动强度:70%最大摄氧量,每次运动时长:60分钟,频率:1次/天,6/周,干预持续时间:6周,其他组无任何运动干预。最后一次有氧运动后24小时取材,取材前称重,注射乌拉坦溶液麻醉后处死,取血、盲肠内容物待测:双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清样本中脂多糖(LPS)浓度;在无菌条件下去除盲肠内容物待测;盲部肠内容物进行16S rRNA基因序列测序,分析肠道菌群的OTUs、Alpha-diversity多样性分析、Beta-diversity多样性分析、组间差异分析检测肠道菌群的多样性。研究结果:通过对25个样本进行16S rRNA基因序列测序发现,(1)与C组血清LPS活性相比,H组出现LPS增高,且极显著差异(P<0.01);与H组血清LPS活性相比,J组出现LPS减少,且极显著差异(P<0.01),S组出现LPS减少,具有显著性(P<0.05),U组出LPS减少,且极显著差异(P<0.01)。(2)与H组相比,姜黄素干预、有氧运动联合姜黄素干预增加了高脂饮食大鼠与C组的OUT组成的相似性。(3)在Alpha-diversity多样性分析中,H组大鼠与C组相比,Chao1、Shannon、Simpson指数异常(P<0.01),H组大鼠发生肠道菌群紊乱,与H组相比,S组、J组肠道菌群群落丰富度、多样性发生显著变化(P<0.05),与U组相比,S组、J组肠道菌群群落丰富度、多样性无显著变化(P>0.05)。(4)在肠道菌群结构分析中发现:与H组相比,J组、S组、U组大鼠肠道菌群中F/B比值发生变化,并且出现不同程度的下降,其中J组、S组大鼠肠道菌群中F/B 比值显著性减少(P<0.05),U组大鼠肠道菌群中F/B比值无显著性变化(P>0.05);与U组比较,J组、S组大鼠肠道菌群F/B比值没有显著性变化(P>0.05)。(5)Beta-diversity多样性分析中,主要“元素”在三个主坐标中的贡献率分别是54.71%、17.33%、10.9%。(6)ANOSIM相似度分析证实了干预对肠道菌群的有效性(P<0.01)。(7)LEfSe分析中发现C组、H组、J组、S组、U组起重要作用的生物标识分别有13个、10个、6个、1个、11个。研究结论:单一有氧运动或姜黄素干预均可改善高脂饮食大鼠肠道菌群的多样性;二者联合使用的效果并未优于单一干预效果。
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