人外周血嗜酸性粒细胞钙激活钾离子通道在支气管哮喘发病中的作用

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支气管哮喘(简称哮喘)是一种常见病,且近年来发病率有增长的趋势。目前认为该病是由炎性细胞引起的一种慢性气道炎症,这种炎症使易感者对各种激化因子具有气道高反应性。嗜酸性粒细胞(EOS)的聚集、活化及通过脱颗粒释放介质在引起气道炎症和高反应性上发挥着重要作用。随着膜片钳技术的发展,人们发现EOS钙激活钾离子通道(Kca)在调节EOS的膜电位及分泌反应或颗粒蛋白的释放发挥重要的作用。但EOS Kca通道在哮喘中的作用还不清楚,本实验正是从研究哮喘患者EOS Kca通道的变化和观察抗哮喘药物对其通道的影响入手,探讨EOS Kca通道在哮喘发病中的作用。 本实验分为三部分 1、适合膜片钳研究的急性人体外周血EOS分离和EOS Kca通道的鉴定。 采用改良的Percoll不连续密度梯度法分离EOS,用膜片钳单通道记录法记录Kca通道电流并进行鉴定。 结果:分离20例外周血样本,结果表明:EOS的回收率为(48.2±6.9)%;台盼蓝染色活率>99%;EOS形态改变<3%;EOS纯度为(90.5±3.6)%;中性粒细胞为(3.9±0.9)%;红细胞含量为(5.3±1.1)%;单核细胞血小板未见到,EOS形态完整。 在细胞贴附式条件下,无电流活动。当浴液中加入血小板活化因子(PAF)0.2μmol·L-1后,出现有两种水平的内向电流活动,反转电位约为-85my,与K+反转电位接近。
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