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目的上世纪六十年代以来,数十个国家的临床实践证明,复方甘草酸苷具有抗炎、抗纤维化、抗病毒、免疫调节等多种生物学功能,其抗病毒作用尤为显著。但是,针对复方甘草酸苷抗病毒免疫作用机制的研究报道较少,其分子机制尚不清楚。鉴此,本文针对复方甘草酸苷体外诱导抗病毒分子及免疫调节的作用进行研究,以探讨其具体的作用途径,为阐释其临床抗病毒疗效提供重要的理论支持。方法实验中以不同组织来源、不同种属来源的A549、Hela、SMMC-7721、TC-1四种细胞株作为研究对象,应用MTT法检测复方苷草酸苷对四种细胞增殖的影响；运用RT-QF-PCR技术检测复方苷草酸苷处理后四种细胞中抗病毒免疫关键基因IFN-β1、IRF3及ISG15的表达变化；采用Western blot法对IFN-β1、ISG15蛋白及IFN信号通路下游效应抗病毒蛋白Mx的含量变化加以验证性分析；运用ELISA法检测复方甘草酸苷处理后四种细胞中关键抗病毒免疫分子IL-29、 IL-12、IFN-γ的变化。上述实验数据,采用SPSS13.0进行统计学分析。结果与讨论MTT分析结果表明,复方甘草酸苷短时间刺激对TC-1细胞增殖影响较大而随作用时间的延长,对A549和Hela细胞的影响较显著。80μg/ml作用48h时四种细胞的相对生长率在50%到70%之间,故选择该浓度为后续实验研究之复方苷草酸苷的作用浓度。RT-QF-PCR研究发现,复方苷草酸苷刺激A549及Hela细胞12h,IFN-β1、 IRF3及ISG15基因的表达均达到最高水平(P<0.05),三者均呈现较为明显的峰度变化且有较好的趋势相关性。SMMC-7721及TC-1细胞相关基因表达的峰度变化较为平缓,三者表达变化的趋势也成一定的相关性。Western blot检测结果显示,虽然不同细胞株的响应时间有所差异,但均展示出复方甘草酸苷对抗病毒效应分子的显著诱导作用。与正常对照组相比,A549及SMMC-7721细胞IFN-β1蛋白的表达水平24h较高(P<0.05),Hela及TC-1细胞48h较高(P<0.05);A549、Hela及TC-1细胞ISG15蛋白的表达水平24h较高(P<0.05),而SMMC-7721细胞48h较高(P<0.05)；对于Mx蛋白的表达水平,A549及Hela细胞24h较高(P<0.05),SMMC-7721及TC-1细胞48h较高(P<0.05)。ELISA检测结果提示,A549及Hela细胞中IL-29在复方甘草酸苷处理12h时含量较高(P<0.05),SMMC-7721及TC-1细胞各检测时间点之间IL-29含量差异无统计学意义(P>0.05);IL-12及IFN-γ的检测结果均为阴性。结论复方甘草酸苷作用于A549、Hela、SMMC-7721、TC-1细胞,均能引起IFN-β1、 IRF3及ISG15表达的一致性变化,三者可能共同作用而成为一条抗病毒免疫途径。复方甘草酸苷可能通过上调IFN-β1的表达来激活Mx蛋白的产生,这是其抗病毒作用的重要效应途径。此外,复方甘草酸苷刺激A549和Hela细胞,IL-29的表达升高,提示还可能存在IL-29参与的抗病毒免疫途径。综上所述,复方甘草酸苷可能通过激活或上调IFN-β1、ISG15、IL-29及抗病毒蛋白Mx的表达,来行使其抗病毒及免疫调节的分子药理学作用。