柘木总多酚的制备及其抗氧化活性研究

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柘木是我国传统中药材,具有抗肿瘤、抗炎镇痛、抗氧化等药理活性。文献报道柘木中的黄酮及其他多酚类是其主要有效成分。本课题对柘木总多酚的制备工艺及其抗氧化活性进行研究,为阐释柘木药效物质基础和进一步开发利用提供参考。采用大孔树脂,以氧化白藜芦醇为指标性成分,研究建立柘木总多酚制备工艺。选用AB-8、LX-38、LX-60、D101四种代表性大孔树脂进行筛选,优选出制备性能较好的AB-8大孔树脂,建立的优化工艺为:柘木茎药材经8倍75%乙醇提取2次,每次1.5h,提取液合并浓缩至相当于生药材0.5g/ml,上预处理好的AB-8树脂柱(柱体积,1BV),依次用水、50%、70%乙醇各5BV洗脱,50%、70%乙醇洗脱部分分别减压浓缩,干燥,即得相应柘木总多酚组分(CTF1;CTF2)的提取物。进一步采用LX2000小孔树脂、反相硅胶等柱色谱分离技术,从CTF1中分离得到其主要成分氧化白藜芦醇。采用高效液相法分析,测得CTF1、CTF2中氧化白藜芦醇的含量分别为212.5mg/g、198.7 mg/g。采用亚硝酸钠显色法,以芦丁为对照品,测得CTF1、CTF2中以芦丁计总黄酮含量依次为56.5%、46.3%。分别采用DPPH、ABTS两种自由基清除实验,以芦丁为对照,对柘木总多酚及主成份氧化白藜芦醇的抗氧化活性进行测试。结果表明,柘木多酚组分对两种自由基均有较强的清除能力,并与样品剂量呈正相关。按半数清除率浓度(IC50,?g/m L)计,清除DPPH自由基的能力为芦丁(9.7)>氧化白藜芦醇(11.2)>CTF1(19.1)>CTF 2(25.3);清除ABTS自由基能力大小为氧化白藜芦醇(29.7)>CTF 1(49.3)>CTF 2(60.1)>芦丁(181.6)。研究结果表明,柘木总多酚(CTE,由CTF1和CTF2加和组成)的抗氧化活性与芦丁相当,其中氧化白藜芦醇及其他黄酮类成分是其主要的抗氧化活性成分。
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