创口愈合性别差异的体外实验研究

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研究背景:性别和性激素可以影响创口的愈合。我们通过体外实验,检测在没有性激素作用的情况下,性别对于愈合有无影响。 材料和方法:取3周大的雌性和雄性SD大鼠背部皮肤,组织法培养皮肤成纤维细胞,并通过免疫组化检测成纤维细胞表型。通过如下方法比较雌性和雄性成纤维细胞的功能差异:MTT实验检测细胞增殖水平,划痕实验检查细胞迁移速度,胶原蛋白网络实验(fibroblast—populated collagen lattices,FPCL)检测细胞收缩功能,同位素标记实验检查胶原蛋白合成水平。 结果:雄性成纤维细胞的波形蛋白(vimentin)和α—平滑肌动蛋白(α—smooth muscle actin,α—SMA)阳性率高于雌性(vimentin: 96.8±0.9% vs 76.3±1.1%,p=0.002;α—SMA: 78.3±1.5% vs 7.7±0.3%,p<0.001)。雄性成纤维细胞的增殖水平高于雌性(MTT: 0.295±0.016 vs 0.106±0.008,p=0.002)。不论加入TGF—β1与否,雄性成纤维细胞收缩细胞外基质的能力均强于雌性(FPCL剩余面积:20.4±3.3% vs 35.2±3.8%,p<0.001;加入TGF—β1后10.7±3.3% vs 19.8±2.0%,p<0.001)。雄性成纤维细胞迁移速度有快于雌性的趋势(653μm/12h±59μm/12h vs505μm/12h±62μm/12h,p=0.103)。雌性成纤维细胞合成胶原蛋白的能力(3193±313 dpm vs 1689±334 dpm,p=0.008)高于雄性。 结论:在没有性激素作用的环境下,愈合过程仍存在性别差异。愈合早期雄性成纤维细胞的功能(细胞增殖、迁移和收缩创面)强于雌性,而愈合后期雌性成纤维细胞的功能(合成胶原蛋白)强于雄性。
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