银杏叶提取物温度敏感型鼻用原位凝胶的研究

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目的:研究银杏叶提取物温度敏感型鼻用原位凝胶的含量测定、工艺制备、体外释放、安全性与稳定性、药效学。方法:建立HPLC-UV测定银杏叶提取物中总黄酮的含量。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为甲醇-0.4%磷酸(55:45,V:V);流速:0.8mL·min-1;检测波长:360nm;柱温:30℃;进样量:20μL。建立HPLC-ELSD法测定银杏叶提取物中萜类内酯的含量。色谱柱为Diamonsil C18色谱柱;流动相:甲醇-四氢呋喃-水(25:10:65,V:V:V);流速:0.8mL·min-1;气体流速:2.7mL·min-1;柱温:35.00℃;进样体积:10.0μL;漂移管温度:115.0℃。通过对银杏叶提取物中黄酮、萜类内酯的含量测定来建立银杏叶提取物的测定方法。以黏度为指标,正交试验来确定凝胶制备最佳工艺。以无膜透析试验考察银杏叶提取物鼻用原位凝胶的溶蚀情况;以生物膜(牛、羊鼻黏膜)透析试验模拟人鼻黏膜对药物的透析情况;以透析袋试验考察药物的分子量(大小)对进入人体的影响,考察银杏叶提取物原位凝胶体外释放研究。采用在体蟾蜍上颚模型考察银杏叶提取物鼻用原位凝胶及辅料对纤毛运动的影响来评价制剂的鼻黏膜毒性。制备3批银杏叶提取物鼻用原位凝胶,进行高温试验、光照试验、高湿试验,考察银杏叶提取物鼻用原位凝胶稳定性。采用对氢溴酸东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍的影响、对亚硝酸钠所致小鼠记忆巩固不良影响、对乙醇所致小鼠记忆再现障碍的影响进行药效研究。结果:经方法学考察,含量测定方法简便、快捷、准确、易行。通过正交实验结果,确定泊洛沙姆407洛沙姆188为15:20,壳聚糖0.4%,HP-β-CD30%为最佳制备工艺。通过体外释放研究,表明药物是通过扩散作用进入体内而不是通过凝胶溶蚀使药物释放的。不同剂量银杏叶提取物原位凝胶改善鼠学习记忆功能障碍。结论:银杏叶提取物温度敏感型原位凝胶具有良好的缓释作用,可由鼻-脑通道直接进入脑内发挥作用,可以使药物更有效的被吸收,提高生物利用度,有利于患者的治疗在同等药效的情况下鼻腔给药可减少口服给药量,降低用药成本。
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