伊维菌素(Ivermectin, IVM)为半合成大环内酯类抗寄生虫药物,具有广谱、高效、用量小和安全程度高等优点,对线虫和节肢动物具有高效的驱杀作用,以内服、皮下注射及浇淋等多种给药方式,广泛用于防治畜禽相关寄生虫感染。本文联合使用可生物降解的高分子沉淀型基质RB及高分子缓释材料PLA,制备4%伊维菌素注射用原位凝胶,冀望缓慢释放,能在较长时间内维持有效血药浓度,节省人力、物力和财力,更好地发挥其防治寄生虫感染作用。具体研究内容如下：1.处方前研究 测定了IVM的平衡溶解度、油水分配系数；建立了体外测定其含量的高效液相色谱法(HPLC)。IVM易溶于乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)等有机试剂；水中LogP值为3.58,具有较强的脂溶性。体外检测IVM含量的HPLC色谱条件为：流动相甲醇：水(95：5),紫外检测波长245nm,柱温350C,流速0.8 mL/min。在0.2～50μg/mL内线性关系良好,回归方程为Ar=23393C-1218.6(r2=0.9997),方法专属性强,精密度及回收率符合方法学要求。2.处方组分用量筛选 以24 h突释量和30 d累计释放量为指标,筛选了IVM注射用原位凝胶的处方组分用量。结果发现：①当溶剂用量由25%降至15%,以乙酸乙酯、NMP、苯甲酸苄酯为溶剂制备的原位凝胶,药物突释量由52.3%、46.4%、54.1%分别降至33.5%、30.1%、35.6%,累计释放量由82.4%、73.3%、92%分别降至62.1%、53.9%、56.3%；相同用量的乙酸乙酯、NMP、苯甲酸苄酯,含NMP的IVM原位凝胶突释及累计释放量最小,含苯甲酸苄酯的IVM凝胶最大。②载药量由1%增至2%、4%时,同一采样时间点的累计释放量分别增加到2.4～2.9倍、3.1～3.7倍。③含NMP(20%)体系的原位凝胶中,添加0%、1%、3%、5% PLA,24h突释量分为38.5%、27.0%、23.1%、13.9%,30 d累计释放量分为67.7%、66.8%、53.9%、43.8%。④筛选出IVM注射用原位凝胶处方为：每100mL含4g IVM,15mL NMP,5g PLA,其余为基质RB。3.处方工艺重现性、理化性质及初步稳定性考察按筛选出的最优处方制备三批次4% IVM注射用原位凝胶小样。相关研究显示：该处方工艺重现性良好,药物含量、释放度无显著差异；80 d体外累计释放量达80%左右,释药机制可能为药物扩散协同骨架溶蚀。所制凝胶成形性良好,黏度低、通针性良好。对高温稳定,对强光不稳定；用棕色西林瓶包装,40℃、RH75%的条件下放置6个月,稳定性良好。4.血浆样品中IVM的HPLC-荧光检测方法建立 色谱条件：流动相甲醇：水(97：3),荧光检测器,激发波长(Ex)365nm发射波长(Em)465nm,柱温40℃,流速1.0mL/min。IVM在1～250 ng/mL内线性关系良好,回归方程为Ar=54174X+ 124396(R2=0.9991);方法专属性强；检测限为0.5 ng/mL,定量限为1 ng/mL;精密度及回收率均符合方法学要求。血浆样品经乙酸乙酯和乙腈提取,再经N-甲基咪唑溶液和三氟醋酸酐溶液衍生后,进样测定,该提取衍生法回收率高,分离度高,无杂质干扰峰。5.4% IVM注射用原位凝胶犬体内药动学研究12只犬随机分为两组,分别皮下注射4 mg/kg的IVM注射用原位凝胶和0.5 mg/kg的IVM普通注射液,HPLC-荧光法测定血浆中IVM浓度,winnonlin药动学软件非房室模型分析。原位凝胶组参数为：AUC0→∞(5383.12±241.97)d·ng/mL;AUC0→t为(5379.68±241.97)d·ng/mL;t1/2λz为(24.37±1.71)d;tmax为(4.83±2.48)d;Cmax为(182.93±26.47)ng/mL;MRT 为(32.86±0.91)d。普通注射液组参数为：AUC0→∞为(772.89±44.48)d·ng/mL; AUC0→t为(767.53±48.13)d·ng/mL;t1/2λz为(4.80±1.04)d;tmax为(2.00±0.00) d;Cmax为(149.54±15.33)ng/mL;MRT为(7.24±0.69)d。结果表明：IVM注射用原位凝胶消除半衰期和体内平均滞留时间大大延长,维持有效血药浓度长达110～120 d。证明所研制的IVM注射用原位凝胶,缓释长效作用明显。