磺胺类药物(SAs)是畜牧业生产上广泛应用的一类化学合成抗菌药,其具有性质稳定,易于保存以及副作用低等优点。然而过量该类药物使用会引起人的过敏性反应,且有可能致癌。磺胺类药物在动物性食品中残留引起的生态环境污染和人类健康危害已倍受关注,因此许多国家对磺胺类药物最高残留量(MRL)均做了明确的规定。目前用于磺胺类药物残留的检测方法很多,如气相色谱法(GC)和质谱法(MS)、高效液相色谱法(HPLC)等多种理化方法。虽然这些方法灵敏,准确,但是样品前处理步骤繁琐,花费时间长,费用高,限制了它的广泛使用。因此研究开发一种快速简便的磺胺类药物残留检测技术已迫在眉睫。酶联免疫吸附检测法(ELISA)以及胶体金免疫层析技术(GICA)具有快速、简便、特异性好和灵敏度较高等优点,是药物残留检测的一种有效方法。本研究的目的是建立分泌抗磺胺类药物单克隆抗体杂交瘤株,为建立磺胺类药物免疫学检测方法基础材料。本研究采用化学方法合成3种具有磺胺类药物母核结构的半抗原,并通过核磁共振仪以及液-质联用来鉴定为预期产物。用重氮化法将3种合成半抗原以及5种磺胺类药物(磺胺胍、磺胺噻唑、磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑)与牛血清白蛋白和卵清白蛋白偶联,用紫外光谱、红外光谱鉴定偶联成功。用偶联的完全抗原免疫BALB/c雌性小鼠6~7次,用双向琼脂扩散法以及间接ELISA方法检测血清效价,当间接ELISA效价达到1:6400以上时,取高效价的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用HAT培养基筛选培养,在融合后第4~5天出现小的克隆,第10天杂交瘤细胞铺满孔底的60%,用建立的间接ELISA法筛选阳性孔,筛选得到阳性杂交瘤细胞。本研究成功合成3种半抗原,并利用重氮偶联法成功制备免疫原和包被原。利用细胞融合技术,成功制备了分泌抗磺胺类药物单克隆抗体杂交瘤株,为建立磺胺类药物免疫学检测方法奠定了坚实基础。