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本文所研究的产酸克雷伯式菌（Klebsiella oxytoca XCH-1）是从青岛海藻化工厂海带浸泡液中筛。该菌在其生长过程中产生大量粘性的胞外多糖，为了进一步开发利用Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖，本文对Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖做了比较详细的研究。包括发酵，理化特性，结构及生物活性等。 本文采用发酵法制备Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖。Klebsiella oxytoca XCH-1菌发酵产生胞外多糖受多种因素的影响，如通气量、培养基的起始pH以及培养基的营养成分。实验结果表明，对于Klebsiella oxytoca XCH-1菌产胞外多糖的发酵，甘露醇为最佳碳源，硫酸铵为最佳氮源。采用均匀设计方法对发酵条件进行了研究，结论为甘露醇初始浓度为1％，C：N为50：1，温度为23℃，初始pH为8.18，接种量为9％。Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖的产量为5.93mg／g。 首先发酵Klebsiella oxytoca XCH-1，并用乙醇沉淀的方法得到Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖粗品，利用Q—Sepharose FF阴离子交换树脂进行分级纯化，得到主要组分，并对其理化性质进行了全面的分析。Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖为白色粉末，溶于水，并可溶于酸性、碱性溶液中。不溶于有机溶剂。Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖的水溶液呈半透明粘稠状。用Sephaeryl S-300HR凝胶过滤色谱法测得分子量为156000左右。Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖中硫酸基、蛋白质的含量为零。总糖含量为66.45％，糖醛酸含为15.89％。以0.1mol／L NaCl为溶剂配制0.5％的Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖溶液，特性粘度为6.77。 Klebsiella oxytoca XCH-1胞外多糖具有较高的粘度，对热具有相当大的稳定性，短时间内，耐受100℃高温。pH4—8范围内，相对粘度基本不变。电解质对胞外多糖的相对粘度有一定的影响，随着NaCl、CaCl2、Na2B4O7浓度加大，相对粘度逐渐降低，当NaCl、CaCl2、Na2B4O7的浓度分别达到并超过3％、1％、1.5尤才ebslella呷toca xcH一l菌的筛选及其胞外多糖的研究%时，KlebsiellaO砂toca xcH一1胞外多糖溶液的相对粘度基本保持不变，表现出一定的抗盐性。犷飞本文研究了刀e五siella oxrtoca xeH一1胞外多糖对Pb（11）、ed（Ix）、er（vl）、呵ll))的脱除能力。探讨了反应时间、重金属溶液浓度·溶液的pH值等因素对丫少‘，尹召bsiellao砂Ioca XCH一1胞外多糖脱除重金属能力的影响。结果表明Klebsiella 口习尸toca XCH一1胞外多糖对以上几种重金属离子有良好的脱除作用。刀e加i心lIa 口划toca XCH一1胞外多糖吸附重金属离子的能力顺序为F叹m)>Pb（n）>Cd（旦） >cr（vi）。强酸性条件不利于KlebsiellaO划toca xcH一1胞外多糖对重金属离子豹 吸附，在弱酸性或接近中性时有利于吸附。 根据《食品安全性毒理学评价程序和方法》中急性经口毒性（LDs。）分级耘 准，通过小鼠急性经口毒性实验确定Klebsiella oxytoca xCH一1胞外多糖和磷貌刀云bstellao大ytoca xCH一1胞外多糖可能为实际无毒物质。 本文将刀召bsiella口习尸toca XCH一1胞外多糖进行化学修饰，得到磺化刀‘bsi公fIa。划犷口ca xcH一1胞外多糖，并用红外光谱验证了一05伪一取代的情况。对移蓦七灯‘bsiellao荞Ftoca XCH一1胞外多糖的抗凝血活性进行了研究。实验表明，磺化尤2云bsisllao砂toca xCH-1胞外多糖具有一定的抗凝血活性。 利用MTT法进行了淋巴细胞毒性实验、用ELIsA法测定了I刚一Y、IL一2、 IL一10、IL一12含量，实验表明刀‘bsiellao砂toca XCH一1胞外多糖及水解后豹Klebsiella山卿toca xcH一1胞外多糖均有明显的免疫增强活性。有促进T、B细胸豹 增殖反应，虽然对T细胞直接活化所致的IFN一丫和IL一2的产生未见明显的影响葬 用，但对抗原提呈细胞活化所致的诱导IFN一Y产生有非常明显的增强作用。一 本文利用温和的酸水解得到低分子量的Klebsiella似叫oca xcH一1胞外多糖，并对其进行了结构的分析，主要使用了高效凝胶过滤色谱、红外光谱、酸水解气气相色谱、甲基化反应、气一质联用色谱和核磁共振等方法。用HPSEC法测定其分子量为40200左右。用GC分析低分子刀‘bsiellaXCH一1胞外多糖，其主要单糖组成为鼠李糖、半乳糖、葡萄糖。利用核磁共振普谱法对低分子的人介bsiella oxytoca xcH一1胞外多糖进行结构分析，结合甲基化豹Klebsiellaa习户toca xcH一l菌的筛选及其胞外多糖的研究结果，证明主链结构中:鼠李糖有a、p两种构型，葡萄糖主要有p构型，半乳糖主要有Q构型。支链葡萄糖与主链鼠李糖以1一2连接，其构型也为p构型。