沙姜多糖的提取及抗肿瘤活性研究

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本实验以水提醇沉法从沙姜里提取出沙姜粗多糖,通过单因素实验和正交试验分析确定其最佳提取工艺条件为:提取时间6.5 h,料液比1:35,提取温度80℃,提取次数1次,此条件下粗多糖的平均得率为8.53%。对提取出的沙姜粗多糖进行成分与含量测定,发现多糖含量仅为34.26%,而蛋白质含量高达16.40%,通过三氯乙酸法(TCA)除去蛋白质纯化后测得多糖含量为75.20%,蛋白残留0.54%,糖醛酸含量为24.17%。紫外光谱分析显示,纯化后的沙姜多糖不含蛋白质或核酸。红外光谱分析发现沙姜多糖是一种α-型吡喃聚糖。通过液相色谱检测得其分子质量为8.5 × 105 Da,采用离子色谱分析发现其单糖组成摩尔比为岩藻糖:阿拉伯糖:木糖:半乳糖:葡萄糖:鼠李糖:甘露糖:葡萄糖醛酸:半乳糖醛酸=0.37:3.12:1.23:6.39:1.36:3.09:1.00:0.91:1.27。建立H22肿瘤小鼠模型,研究沙姜多糖在动物体内的抗肿瘤活性,结果发现中剂量(200 mg·kg-1d-1)组和高剂量(300 mg·kg-1d-1)组对肿瘤抑制效果较好,无显著差异,表明沙姜多糖在荷瘤鼠体内可有效抑制H22细胞增殖。同时采集实验鼠的基本生理指标,检测观察其非特异性免疫细胞活性(腹腔巨噬细胞和脾NK细胞活性检测)、脏器指标(H&E染色观察、淋巴细胞亚群测定和脾细胞增殖实验等)和血液指标(血常规检查和外周血淋巴细胞亚群测定等),结果发现多糖组荷瘤小鼠的NK细胞的杀伤力和腹腔细胞的吞噬能力均显著增强,胸腺和脾脏维持了良好的外观形态,各指标较模型组得到增强和改善,更与空白组接近。表明沙姜多糖通过提升荷瘤小鼠的自身免疫能力,发挥抗肿瘤作用。综述,沙姜多糖是一种α-型吡喃聚糖,在动物体内能提升免疫细胞的活性,增强机体的免疫功能,具有良好的抗肿瘤效果。
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