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[目的]在基因和蛋白水平检测胃癌组织中CCNE1的表达,研究其与临床病理参数的相关性,从CCNE1表达调控机制出发选择其剪接异构体,进一步检测基因剪接异构体在胃癌原发组织及其配对癌旁正常组织中的表达,探讨CCNE1及其基因剪接异构体与胃癌发生和发展的关系。[方法]2007年9月到2009年7月收集34例实施胃癌根治术的患者的手术切除标本,所选取标本均于术后1小时内取回、分装并于液氮冻存;通过生物信息学方法-Oncomine(肿瘤微阵列数据库)分析CCNE1在胃癌原发灶及其配对正常组织中的差异表达情况。根据生物信息学的预测结果,采用SYBR Green-实时定量荧光PCR技术检测34例手术切除的胃癌原发组织、癌旁正常组织配对样本中CCNE1基因及其2种基因替换剪接异构体(CCNE1 typeⅡ、CCNE1 typeⅢ)的mRNA的相对表达变化,并分析CCNE1基因及其替换剪接异构体的相对表达变化与疾病分期之间的关系。采用组织芯片/组织微阵列(TMA)技术结合免疫组织化学方法(EnVision二步法)检测CCNE1在34例配对样本中的蛋白表达情况及亚细胞定位,并分析其与临床病理参数之间的关系。[结果]胃癌原发灶CCNE1 mRNA表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.01),在胃癌组织中CCNE1 mRNA表达水平在Ⅱ+Ⅱ期和Ⅲ+Ⅳ期均呈现显著上调(P=0.042, P=0.016)。CCN.1替换剪切异构体CCNE1 typeⅡ和CCNE1 typeⅢ经SYBR Green-real time PCR检测显示同癌旁正常组织相比较,两种异构体在胃癌原发灶中表达上调(P=0.015,P=0.019),异构体CCNE1 typeⅠ. CCNE1 typeⅣ的表达水平在胃癌原发组织和癌旁正常组织中差异无统计学意义(P=0.383,P=0.412).组织微阵列(TMA)技术结合免疫组化方法显示:在胃癌原发组织中CCNE1蛋白阳性表达率(14/34)显著高于癌旁正常组织0%(0/34)及胃炎组织0%(0/34) (P<0.01)。CCNE1蛋白表达水平与肿瘤分化程度呈负相关,与肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。[结论]CCNE1基因及其替换剪接异构体的表达上调可能与胃癌的发生、发展密切相关,提示CCNE1的检测可能为胃癌的诊断标志,对于CCNE1的表达水平的检测可为预后预测提供参考依据。