为优化人胚胎生殖细胞(hEG)的体外培养体系及研究5-氮杂胞苷对hEG向心肌前体细胞分化的影响,我们分离培养了人胚胎生殖腺嵴和肠背系膜中原始生殖细胞(PGCs)周围的成纤维样细胞,证实其具有稳定的生物学特性,并首次证实其表达体外培养hEG所必需的细胞因子。以此人胚胎成纤维样细胞作为饲养层细胞,模拟PGCs在早期胚胎发育过程中不断迁移、扩增并保持未分化状态时的体内环境,同时添加bFGF、LIF和forskolin细胞因子,体外成功培养hEG,并对其生物学特性进行鉴定。所培养的hEG可传8～10代,并能够自我更新,保持未分化状态、正常人类二倍体核型及多向分化能力,建立了一种新的hEG体外培养方法。为hEG的进一步研究及其临床应用奠定了基础。在此基础上,进一步利用半定量逆转录多聚酶链反应检测5-氮杂胞苷对hEG向心肌前体细胞分化的影响。初步研究表明,5-氮杂胞苷可能具有促进hEG向心肌前体细胞分化的能力。同时,我们亦自人早期胚胎中分离培养人胚胎心肌细胞,并对其生物学特性进行初步研究。为今后心血管疾病的干细胞移植治疗研究奠定了基础。