论文部分内容阅读
目的采用重组质粒转染技术(sh-RNA),敲减胶质瘤细胞内长链非编码RNA ATB基因后,阐述长链非编码RNA ATB对人脑胶质瘤细胞恶性生物学特征的影响。方法采用Real-time PCR方法检测79例不同恶性程度人胶质瘤组织、15例正常脑组织(来自颅脑损伤术后患者)、人脑胶质瘤细胞系中长链非编码RNA ATB的表达情况。采用sh-RNA技术构建相关细胞模型,利用细胞增殖计数法(CCK-8)检测细胞增殖活力,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,划痕实验及Transwell方法检测胶质瘤细胞的侵袭能力,我们进一步用体内实验(即裸鼠成瘤实验)来探究ATB基因在裸鼠体内的功能作用,用成瘤组织做Western blot法和免疫组化分别分析成瘤组织中PCNA蛋白和Ki-67蛋白的表达情况,进而检测成瘤组织增殖能力的情况。观察并探究长链非编码RNA ATB基因对人胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。结果与正常脑组织相比,ATB基因在胶质瘤组织以及细胞中均是表达上调。敲减胶质瘤细胞内的长链非编码RNA ATB基因后可抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力。裸鼠成瘤实验表明敲减胶质瘤细胞内的长链非编码RNA ATB基因后,可明显抑制裸鼠的成瘤能力,包括裸鼠成瘤体积和成瘤重量均小于实验组,Western blot法和免疫组化结果表明实验组中成瘤组织中的PCNA蛋白和Ki-67染色阳性数目明显减少,表明实验组裸鼠成瘤增殖能力明显低于对照组。结论我们报道了ATB基因在胶质瘤细胞株及胶质瘤组织中均是高表达,敲减长链非编码RNA ATB后可抑制人胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力,为临床上胶质瘤患者的靶向治疗提供了一种潜在的方法。