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盆腔器官脱垂（Pelvic organ prolapse,POP）作为女性常见慢性病,严重影响生存质量。盆底重建手术用于中重度POP的治疗,常使用不可降解的聚丙烯合成网片作为手术材料进行修补,但术后易产生如疼痛、感染等不良反应。近年来,虽然POP的治疗已取得显著进展,但实现盆底结缔组织和肌肉组织的修复与再生仍较为困难。组织工程可在一定程度上解决器官损伤引发的疾病,基于组织工程的生物材料作为盆底重建手术的新型材料,能替代受损组织并促进组织新生,以帮助盆底结构和功能修复。脱细胞基质是一种天然生物材料,主要由蛋白聚糖、弹性纤维和生长因子等成分组成。脱细胞羊膜基质（Decellularized human amniotic membrane,d HAM）具有良好组织相容性,为细胞提供适宜的生物微环境,广泛用于组织工程,但其力学支持差、降解速度快,常与其他材料混合使用。聚己内酯（Polycaprolactone,PCL）与聚乳酸-羟基乙酸共聚物（Polylactic acid-glycolic acid copolymer,PLGA）属聚合型聚酯,降解速度可通过聚合条件及单体配比而调节,具有生物相容性,可支持细胞生长及组织修复。本课题利用静电纺丝技术,制备了以聚己内酯/聚乳酸-羟基乙酸共聚物-脱细胞羊膜（PCL/PLGA-d HAM）静电纺丝膜为代表的支架材料,并对其理化特性和生物学特性进行表征,旨在开发新型POP支架材料并进行前期基础实验研究。第一部分,综述了组织工程在POP中的研究现状。从支架材料、种子细胞和细胞因子三方面探讨了组织工程与POP相关研究,如理想支架材料特点、原料选择标准和支架制备方法,成纤维细胞、干细胞等作为种子细胞的应用,与盆底病相关的细胞因子作用等。由此可知,盆底修复材料常采用多种材料并选择先进技术复合制备而成,优势互补,加之以间充质干细胞为主的种子细胞及细胞因子的辅助,共同构建针对盆底病的完备组织工程材料,同时对本领域的未来研究方向提出展望。第二部分,支架材料的制备。基于前期探索出的羊膜脱细胞技术,进一步验证羊膜彻底、可靠的脱细胞方法并进行表征,将d HAM溶解,配制成电纺液。之后,选择可生物相容和可生物降解的PCL和PLGA,结合d HAM,通过共混、同轴等不同静电纺丝技术及参数优化、调试,制备出G、T、GH和TH四种电纺材料,其在微观下呈致密多孔的网状,电纺膜由微米纤维排列组成,结构与细胞外基质的天然结构相似。第三部分,支架材料理化性质的表征。对四种电纺材料进行接触角、红外光谱、热力学性能、力学性能、降解性能等理化性质检测,优化共聚物PCL、PLGA的原料配比及电纺条件,以达到盆底组织工程的要求。结果表明,d HAM被成功纺入复合电纺膜GH和TH中,且加入d HAM后亲水性加强。四种支架具有独特的力学性能,加入d HAM后力学性能降低,但仍可达到盆底组织的力学性能要求,预测后期往上种植细胞会进一步提高力学性能。水解12周后,同轴电纺膜T剩余量较少为86.77%,说明亲水PLGA包裹在外降解更快。加入d HAM含电纺时易产生珠粒,而相比于纯纤维状的复合电纺膜降解更快。酶解6周后,降解速率最快的TH保留65.21%的质量。第四部分,人脐带间充质干细胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs）的分离、鉴定。采用植块法从脐带分离h UC-MSCs,用流式细胞仪检测表面抗原,进行14天体外三项分化诱导,用细胞计数试剂盒（Cell counting kit-8,CCK8）检测并绘制其7天的生长曲线。结果表明CD105、CD90及CD73阳性表达且CD34、CD45及HLA-DR阴性表达,有分化成骨、成软骨和成脂潜能,生长曲线呈“S”形,符合间充质干细胞特征。第五部分,支架材料的生物学特性表征。理化性能合格的四种电纺膜通过CCK8法以及前期分离出的h UC-MSCs进行细胞毒性、增殖实验,验证其生物相容性,用膜片浸提液的间接方式和膜片种植细胞的直接方式检测膜片材料的细胞毒性,以及材料对h UC-MSCs黏附和活性的影响,从而明确该电纺膜在POP治疗中的可行性。四种不同浓度静电纺丝支架提取液均对UC-MSCs增殖有一定抑制作用,但材料毒性等级均小于1,说明静电纺丝支架没有明显的毒性。活死细胞试剂盒染色结果表明,GH和TH支架上细胞生长良好,保持正常的代谢活性和附着形态,活细胞密度明显高于G组和T组。CCK8结果证实上述研究,电纺膜具有良好的生物相容性,可支持细胞增殖。含有d HAM的电纺膜更利于细胞的附着和增殖,展现出其在治疗POP方面的潜力。本研究成功制备出了基于组织工程原理的含d HAM共聚物电纺膜,分别用同轴、共混静电纺丝技术在高压静电下,将PCL、PLGA与d HAM结合,充分保留PCL、PLGA物化特性的同时,创新性的将人羊膜用于电纺,得到了由微米级纤维有序排列构成的PCL/PLGA-d HAM电纺膜,其理化特性及生物相容性良好,对h UC-MSCs无明显细胞毒性,对POP具有潜在的临床应用价值,可为生物网片的设计与制备提供新策略。