【摘 要】
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玉米（Zea mays L.）是我国重要的粮食作物,病害严重威胁其产量。利用转基因技术改变植物抗病基因的表达,可以有效提高植株抗病能力。NPR1是已知的抗病基因,在SA介导的抗病通路中发挥重要作用。本研究通过农杆菌介导的转化方法将At NPR1转入玉米自交系A188,并将获得的转基因株系与郑58进行杂交;同时,我们也研究了Zm NPR1在参与植物免疫响应过程中的功能和分子机制,证实Zm NPR1通
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玉米（Zea mays L.）是我国重要的粮食作物,病害严重威胁其产量。利用转基因技术改变植物抗病基因的表达,可以有效提高植株抗病能力。NPR1是已知的抗病基因,在SA介导的抗病通路中发挥重要作用。本研究通过农杆菌介导的转化方法将At NPR1转入玉米自交系A188,并将获得的转基因株系与郑58进行杂交;同时,我们也研究了Zm NPR1在参与植物免疫响应过程中的功能和分子机制,证实Zm NPR1通过调控防御相关基因Zm SARD1的表达发挥功能。主要研究结果如下:1、利用农杆菌介导的转化方法将At NPR1转入玉米自交系A188幼胚,最后通过筛选、再生,获得6株独立的At NPR1转化株系,经PCR鉴定,其中4株含目的基因和Bar基因,2株目的基因丢失,仅含Bar基因。并将获得的转基因阳性植株与郑58进行回交,获得T1代转基因植株。2、在mRNA水平鉴定了zmnpr1突变体,并在该突变体幼苗根部接种立枯丝核菌,发现其较分离野生型更感病。3、在zmnpr1玉米突变体原生质体中证实Zm NPR1上调Zm SARD1的表达,且该过程不依赖水杨酸（SA）。通过生物信息学预测发现Zm SARD1启动子上有三个TGA结合元件,利用重叠PCR逐一突变该启动子上的TGACG顺式作用元件,发现Zm NPR1调控Zm SARD1是通过-312位的TGACG元件发挥作用。4、利用玉米叶肉原生质体系统研究了不同浓度SA处理对Zm NPR1表达水平的影响,发现其表达随着SA浓度升高受到抑制。综上所述,本研究通过农杆菌方法将抗病基因At NPR1转入玉米A188自交系并获得了可育的转基因株系。发现Zm NPR1参与植物抗病免疫反应。本论文实验结果为今后的研究工作奠定了基础。
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