小鼠左心室肌细胞收缩与钙瞬变对频率和氧化压力应答的跨膜梯度

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目的:研究小鼠左心室肌细胞收缩与钙瞬变对频率和氧化压力应答的跨膜梯度。材料:6周鼠龄的C57雄性小鼠左心室内/外膜层肌细胞分离采用Langendorff灌流术。心肌细胞钙瞬变和收缩舒张功能同步检测使用的是双激光荧光光电倍增系统。结果:实验统计了来自6只小鼠的22个内膜心肌细胞和26个外膜心肌细胞,发现在刺激频率为lhz,台式液灌流情况下,正常小鼠左心室内膜心肌细胞的舒张期钙浓度为0.521±0.023(F340/380),大于外膜心肌细胞的0.466±0.022(F340/380)(p<0.05);钙瞬变振幅为0.241±0.014(F340/380)大于外膜心肌细胞的0.203±0.011(F340/380)(p<0.05);肌织网钙释放速率为20.89±0.923(F/s)小于外膜心肌细胞的22.823±0.814 F/s(p<0.05);肌织网钙回收速率为2.459±0.292(F/s),小于外膜心肌细胞的3.267±0.245(F/s)(p<0.05)。同时,内膜心肌细胞的肌小节长度为1.816±0.033(um)小于外膜心肌细胞的1.834±0.011(um)(p<0.05);肌小节收缩振幅为0.034±0.005(um)小于外膜心肌细胞的0.023±0.002(um)(p<0.05)。刺激频率增加后,内膜心肌细胞的舒张期钙浓度增加了16.29%±2.64%,大于外膜心肌细胞的8.91%±1.12%(p<0.05);收缩期钙瞬变振幅增加了32.12%±5.69%,大于外膜心肌细胞的14.12%±1.67%(p<0.05);胞质钙回收速率的增加129.29%±24.72%,大于外膜心肌细胞的55.50%±4.55%(p<0.05)。相应地,肌小节收缩振幅增加了250.30%±42.08%(n=12)大于外膜层心肌细胞的49.97%±7.56%(n=23,P=0.02<0.05)。肌小节缩短的最大速率加速了433.15%±71.25%(n=12)大于外膜层心肌细胞75.74%±13.95%(n=23,P=0.009<0.05)。当给予100 uM H202暴露1min使内膜心肌细胞收缩振幅增加了0.0155±0.0017(um)大于外膜心肌细胞的0.0096±0.0009(um),P<0.05。内膜心肌细胞钙瞬变振幅增加了0.0737±0.0043(F340/380)大于外膜心肌细胞的0.0284±0.0014(F340/380),P<0.05。正常小鼠内外膜心肌细胞的钙瞬变振幅存在0.045±0.006(F340/380)的差异,而心衰小鼠内外膜心肌细胞的钙瞬变差异为0.005±0.001(F340/380)(P<0.05)结论:小鼠左心室内膜心肌细胞钙瞬变振幅和收缩力均强于外膜心肌细胞。内膜层心肌细胞钙瞬变和收缩舒张慢于外膜层心肌细胞。内膜层心肌细胞钙瞬变和收缩舒张对频率的反应较为膜层心肌细胞更敏感。低浓度段时间的氧化压力使内膜心肌细胞收缩和钙瞬变代偿性增加大于外膜心肌细胞。心衰小鼠内外膜心肌细胞钙瞬变的跨膜梯度消失。
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