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柑橘半穿刺线虫(Tylenchulus semipenetrans)引起柑橘慢衰病(citrus slow decline disease)是重要的柑橘病害线虫,广泛分布于世界柑橘产区。柑橘半穿刺线虫在我国广泛分布,危害严重。本研究对不同地理群体的柑橘半穿刺线虫从形态学、交叉接种寄生性到分子生物学几个方面进行了比较和分析,并建立了柑橘半穿刺线虫特异性检测技术。对我国4个省,寄主分别为杉木、柑橘5个地理群体柑橘半穿刺线虫的形态学进行了显微观测。各种群测量值与前人测量数据基本一致,表明柑橘半穿刺线虫种群间虫体形态保守;所有群体中均有发现近末端钝圆,呈棍状,表面呈缢缩状类型。通过室内、野外交叉接种发现,杉木林地的柑橘半穿刺线虫种群可侵染杉木苗根系,但未能侵染柑橘苗根系;柑橘地的柑橘半穿刺线虫可侵染柑橘根系,但未侵染杉木根系,这与前人的结果不一致。首次对采自我国4个省份柑橘或杉木上27个柑橘半穿刺线虫种群的rDNA-ITS进行测序,提交GenBank,获得序列号,丰富了柑橘半穿刺线虫的核酸数据库;经过对我国4个省的27个柑橘半穿刺线虫种群的rDNA-ITS区进行测序和比对分析,结果表明:我国不同地区的柑橘半穿刺线虫的rDNA-ITS序列保守,差异极小,线虫种群间的序列相似性在98.4%以上,序列变异率为0~1.6%,序列多态性分析表明序列特征上存在差异,具有丰富的多样性;根据序列相似度与系统进化树显示我国柑橘半穿刺线虫的ITS序列与地理位置及寄主无相关性。寄生于杉木或柑橘的柑橘半穿刺线虫种群之间并不能通过rDNA-ITS序列区分是否存在生理小种。本研究根据柑橘半穿刺线虫的rDNA-ITS的序列特征,设计出了一对柑橘半穿刺线虫特异性引物,Ts-SF(正向: 5’- TACCAGGTTGAGCAGAGTTCTT -3’)和Ts-SR (反向: 5’- TCCTACCCTTCCACAGCG–3’)。特异性引物灵敏度高,可扩增出单条柑橘半穿刺线虫二龄线虫的DNA;特异性强及可靠性好,对采自全国4个省份16个不同地区寄生柑橘或杉木的柑橘半穿刺线虫种群均能扩增出特异条带,对非靶标线虫未能扩增出条带;可从改良贝尔曼漏斗法分离的线虫混合群体中检测出单条靶标线虫。本研究建立了柑橘半穿刺线虫特异性检测体系,对柑橘半穿刺线虫的防治具有重要意义和应用价值。