柑桔溃疡病(Citrus Bacterial Canker Disease, CBCD)是严重危害世界柑桔种植业的一种细菌性病害,其病原物为地毯草黄单胞杆菌柑桔致病变种Xanthomonos axonopodis pv. citri(Xac)。CBCD广泛发生在世界各主要柑桔产区,包括亚洲、中东、非洲、太平洋和印度洋诸岛、澳大利亚、南美以及美国东南部的三十多个国家和地区均有不同程度的发生。我国的CBCD主要分布在福建、广东、广西、江西、浙江、湖南、湖北以及云、贵、川等南方柑桔种植区。该病能侵染绝大多数商品化栽培品种,虽然很少会直接杀死寄主,但会导致落叶、落果、树势衰弱和果实生锈斑且品质变劣,严重降低了果品的经济价值。长期以来由于缺乏抗病品种和特效的化学防治药剂,对该病的防治主要采取加强非疫区建设与植物检疫来严防病害的传播,对病树采取挖除并集中烧毁的根除措施。柑桔非疫区建设的疫情监测和柑桔苗木、果品出入境检疫检验要求快速准确的诊断鉴定技术为支撑。传统上柑桔溃疡病的检测方法有常规检测法,包括典型症状目测法、组织病理切片法和病原菌分离培养及致病性测定法等。此外还有噬菌体检测法、酶联免疫吸附法(ELISA)和斑点免疫结合法(DIA)。这些方法在一定程度上存在着检测周期长、过程复杂、灵敏度不高的缺点,不能很好的满足检疫工作的要求。随着生物技术尤其是DNA重组技术的飞速发展,与植物致病性相关基因不断地被鉴定和克隆出来,许多重大疫病的诊断治疗已逐步进入分子水平。分子水平的检测具有快速、特异、灵敏的特点,可以满足现代植物检疫工作的要求。作为国内外重要的检疫性有害生物,近年来柑桔溃疡病菌的快速检测技术研究也取得了长足的进展。DNA杂交诊断法、DNA指纹图谱分析等方法特别是PCR检测技术的应用,使CBCD的检验检疫工作有了一种更加快速、准确、灵敏、便捷的快速检测方法。而荧光定量PCR(Realtime-PCR或FQ-PCR)作为更新的技术,与常规PCR相比,具有更高的检测灵敏度和特异性,不仅能更快速更准确的对病原物进行检测鉴定,无需凝胶电泳分析,避免EB等致癌危险试剂的使用,更环保安全,而且还能对带菌量进行定量分析。该项技术不仅可以在柑桔苗木与产品的口岸检验检疫及国际贸易争端中发挥重要作用,而且还可以用于柑桔溃疡病菌侵染过程中的流行学研究以及病害的预警监测。本研究的目的:在柑桔溃疡病常规PCR检测技术研究的基础上,建立起全新的具有实际应用价值的定量PCR检测技术方法,为柑桔溃疡病的快速准确鉴定以及病害监测预报提供技术支持。