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【目的】研究靶向小干扰RNA(siRNA)对人单核细胞白血病细胞株SHI-1中Ets2基因表达的沉默作用及其对SHI-1细胞化疗敏感性的影响及Ets2基因在白血病患者中的表达情况。【方法】1.应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测28例初治白血病患者骨髓标本和SHI-1细胞中Ets2的表达情况,取5例体检为正常人外周血标本做为对照。2.设计、筛选和体外化学合成3对针对Ets2基因mRNA的siRNA(Ets2 siRNA-1,Ets2 siRNA-2和Ets2 siRNA-3),用电穿孔方法转染SHI-1细胞,以未转染siRNA的细胞及转染非特异性的siRNA细胞作对照;同时转染带有绿色荧光蛋白(FAM)的载体作为阳性对照,流式细胞术检测其绿色荧光以确定转染效率;实时荧光定量PCR(real-time PCR)法检测Ets2 mRNA的抑制效应; FITC标记的膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染色流式细胞术检测靶向siRNA沉默Ets2基因后细胞的凋亡和对VP-16诱导SHI-1细胞凋亡的影响。【结果】1. SHI-1细胞中Ets2基因高表达; 28例初治白血病患者中,21例患者骨髓中扩增出Ets2基因,表达率明显高于对照组(p=0.033)。ANLL患者Ets2表达率为73.68% ,ALL为60%,健康对照组表达率为10%。未发现Ets2表达与性别、年龄、ANLL分型、外周血白细胞、血红蛋白和血小板水平相关。2. Ets2 siRNA-3可显著抑制SHI-1细胞Ets2 mRNA表达,这种抑制作用在沉默48h后最明显,mRNA表达水平下降约30%。Ets2 siRNA-1可使Ets2 mRNA表达程度下降约10%而Ets2 siRNA-2沉默效应不明显。3.Ets2基因沉默后细胞凋亡率可在一定程度上增加(P=0.0001),且对VP-16诱导SHI-1细胞凋亡有促进作用(P=0.004)。【结论】Ets2转录因子在白血病细胞中高表达可能与白血病细胞的发生发展有关。靶向siRNA通过沉默Ets2表达而增加SHI-1细胞的凋亡,使其对化疗药物更为敏感性,推测Ets2高表达也很可能与白血病细胞对化疗药物的抵抗存在一定相关性。