鳞翅目昆虫体壁的绿色被认为是黄色素与蓝色素结合的产物,黄色色素大多为类胡萝卜素,而蓝色色素为胆绿素,色素与结合蛋白结合后沉积于组织器官上使其显现出相应颜色。胆绿素结合蛋白(Blin-binding protein,BBP)属于载脂蛋白家族,是能与蓝色色素结合的蛋白;载脂蛋白D(apolipoprotein D,apo D)是一种糖蛋白,可以与胆红素、黄体酮、胆固醇等多种疏水性小分子结合。野生柞蚕(Antheraea pernyi)幼虫体壁表现为黄绿色的保护色,随着长期的进化与人工选择后,其体色表现出高度多样性,有白色、蓝色、红色、黄色等,在实践生产中,柞蚕体色一直是品种选育的标志性特征,但到目前为止还未见柞蚕幼虫体色相关基因被克隆的报道。本研究克隆了柞蚕胆绿素结合蛋白3(ApBBP3)和载脂蛋白D(Apapo D)基因,对这2个基因进行了生物信息学分析,同时检测了这2个基因在柞蚕青、黄幼虫各组织器官中的的m RNA表达水平,以期找到柞蚕青、黄幼虫体色分化的关键基因,并为柞蚕幼虫体色分化的分子机制奠定基础,另外,开展柞蚕体色分子方面的研究对柞蚕的良种选育亦有指导意义。主要结果如下:1.ApBBP3编码203个氨基酸,分子量为50.95k Da,等电点为5.16;氨基酸序列比对表明ApBBP3与柞蚕的BBP3(Gene Bank ID,AFH68246)的相似性为100%;1～16位置含有一个信号肽,但无跨膜区;Apapo D编码207个氨基酸,分子量为51.11k Da,等电点为5.23;氨基酸序列比对表明Apapo D与家蚕的载脂蛋白D(Gene Bank ID,XP004923379)的相似性为69%;1～16位置含有一个信号肽,且有一个跨膜区。2.胆绿素结合蛋白和载脂蛋白D都属于载脂蛋白家族,构建的分子进化树表明,鳞翅目的胆绿素结合蛋白与ApBBP3聚为一类,载脂蛋白与Apapo D聚为一类,表明这些相关蛋白来自于一个共同的祖先;而载脂蛋白又被分成2个部分,说明载脂蛋白序列进一步分为无脊椎动物和脊椎动物两个亚组。3.RT-PCR检测结果表明,ApBBP3在柞蚕幼虫的所有受试组织器官中均表达,青、黄幼虫各组织器官进行比较结果表明,青、黄幼虫的血淋巴和丝腺之间的相对表达量没有显著差异,而脂肪体和中肠之间有显著差异,青、黄幼虫的体壁之间的相对表达量有极显著差异;RT-PCR检测结果表明,Apapo D在柞蚕幼虫的除丝腺外的所有受试组织器官中均表达,青、黄幼虫各组织器官进行比较结果表明,青、黄幼虫的血淋巴、中肠、脂肪体和体壁之间的相对表达量没有显著差异。根据实时定量PCR结果推断,ApBBP3可能在柞蚕青、黄幼虫体色分化过程中起一定的作用,而Apapo D可能没有相关功能。