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目的:本实验通过研究BMSC对白血病细胞的保护作用,通过检测VLA-4抗体干预后白血病细胞凋亡率的改变,研究VLA-4抗体对BMSC保护作用的影响;通过检测抗凋亡基因Survivin、Bcl-2的表达变化,进一步阐明可能机制,为深入研究儿童白血病及其临床治疗提供理论依据。方法:一、收集白血病儿童骨髓标本,并进行分离培养,提取BMSC与白血病细胞并用倒置相差显微镜观察细胞形态;实验选第2代的BMSC和第4~6代的白血病细胞。二、采用荧光染色、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,研究BMSC对白血病细胞的保护作用及VLA-4抗体对其保护作用影响;三、应用RT-PCR法研究各组白血病细胞Survivin、Bcl-2基因的表达情况,从基因水平来说明BMSC、VLA-4抗体、化疗药物三者之间的关系以及它们对白血病细胞凋亡的影响。结果:一、体外单独培养原代白血病细胞生存时间较短,生长状态欠佳;在BMSC存在情况下,其生存时间延长,状态比较好。二、BMSC组的凋亡率低于白血病细胞组(P<0.05);抗体组、抗体加药物组白血病细胞凋亡率较BMSC组明显增高(P<0.05),抗体加药物组、抗体组、药物组三者两两比较均有显著差异(P<0.05);白血病细胞组、抗体加药物组、抗体组、药物组凋亡率随时间的延长而增加(P<0.01)。三、29例急性白血病中,23例有Survivin基因的表达,表达率高达79%;28例有Bcl-2基因的表达,表达率约97%。BMSC组Survivin、Bcl-2表达量明显高于其他各组(上清组除外)(P<0.05);抗体组、抗体加药物组Survivin、Bcl-2表达量较BMSC组低(P<0.05),且抗体加药物组、抗体组、药物组三者两两比较均有显著差异(P<0.05);以抗体加药物组表达量最少,与BMSC组比,Survivin表达降低了56%,Bcl-2表达量则降低了71%。结论:一、白血病患儿BMSC体外对患儿的白血病细胞具有保护作用。二.、VLA-4抗体在体外可促进白血病细胞的凋亡;三、VLA-4抗体能增强VP-16诱导的白血病细胞的凋亡敏感性;四、VLA-4抗体可通过下调Survivin、Bcl-2的表达发挥促凋亡作用;