稻瘟病生防放线菌的分离鉴定及液体发酵条件的优化

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:antonw1
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水稻是我国的主要粮食作物之一。稻瘟病作为水稻三大病害之首,严重危害水稻生产。目前,尚未有根治稻瘟病的理想药剂,微生物生防制剂因其绿色无污染等特性越来越被关注。本研究从江西东乡野生稻根际土壤中分离、筛选水稻稻瘟病拮抗菌,并对其进行功能鉴定;在此基础上,采用响应面优化法,对生防菌的培养条件进行优化,并进一步通过盆栽实验来验证其功能,主要发现如下:1.稻瘟病拮抗菌的筛选与鉴定从江西东乡野生稻根际土壤中分离出56株有益功能菌,获得一株对稻瘟病原菌有高效拮抗作用的放线菌,命名为TL-007,测序鉴定为为黑胡桃链霉菌(Streptomyces Nogalater)。生理生化指标检测证实:放线菌TL-007可以使淀粉水解,分解几丁质,使明胶液化,能够产生吲哚乙酸和过氧化氢酶,最高耐盐度10%;平板拮抗实验表明,该菌对水稻稻瘟病、大豆黑斑病、白菜黑腐病、人参镰刀病、人参锈腐病以及大豆灰霉病病原真菌的抑菌率分别为89.5%、81.48%、80.37%、82.66%、85.93%、76.37%。2.菌株TL-007液体发酵条件优化以抑菌圈直径作为响应值,先确定最佳单因素。进一步通过Plackett-Burman试验对影响发酵的几个因素进行评价,筛选出玉米面浓度、蛋白胨浓度和接种量三个主要因素。再经过最陡爬坡试验以及box-Behnken设计法,得到上述三个因素的最佳值:接种量7.67%、玉米面16.69 g/L、蛋白胨1.87 g/L,获得抑菌圈直径为21.11 mm。3.菌株TL-007发酵液的盆栽抗病效果种子萌发实验中,放线菌TL-007发酵液对水稻种子有明显的促萌发作用,盆栽实验验证放线菌TL-007的抗病促生效果:经放线菌TL-007发酵液处理过的实验组病情指数低至39.67,防效49.67%;经放线菌TL-007单独处理后的水稻幼苗苗长、苗鲜重、苗干重、根长、根鲜重、根干重均高于对照组(CK),分别增幅30.98%、66.67%、181%、55.41%、250%、200%;经放线菌TL-007和稻瘟病共同接种处理后,水稻幼苗的苗长、苗鲜重、苗干重、根长、根鲜重、根干重均高于单独接种稻瘟病的处理组,增幅为20.32%、71.79%、71.43%、58.98%、83.33%、150%。以上说明放线菌TL-007对水稻幼苗有抗病促生作用,具有开发价值。
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