【摘 要】
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目的:通过对不同温度处理的传染性软疣组织差异表达蛋白的检测与分析,为温热治疗作用机制研究提供有指导意义的信息。方法:本研究选择新鲜获取的人类传染性软疣皮损组织作为
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目的:通过对不同温度处理的传染性软疣组织差异表达蛋白的检测与分析,为温热治疗作用机制研究提供有指导意义的信息。方法:本研究选择新鲜获取的人类传染性软疣皮损组织作为研究对象,拟定的研究方案经本课题组所在单位的伦理委员会批准后施行。随机将研究标本分为3组,实验组的标本处理为44.0(±0.1)℃的水浴加热法30分钟的温热刺激,对照组1不进行任何温热处理,对照组2采用37.0±0.1℃恒温水浴加热30分钟。利用TMT蛋白组学技术及液相色谱-质谱分析技术,对蛋白质谱表达情况进行定量,Maxquant软件鉴定差异表达蛋白。对鉴定后的差异蛋白数据,计算差异表达的倍数(同一蛋白质的实验组表达量/对照组表达量),选择1.3倍即比值大于1.3或小于0.769为筛选阈值。对筛选后选择的差异表达蛋白,进行功能分类、GO富集、KEGG通路富集、聚类分析、PPI等生物信息学分析。结果:1.实验组与对照组1比较,共鉴定筛选到370个差异表达蛋白质,其中上调蛋白212个,下调蛋白158个。上调蛋白主要参与病毒基因表达调控、DNA与RNA代谢、对IFN-γ的反应、多种胞内物质的分解代谢、蛋白质在胞内的运输与定位等生物学过程。下调蛋白主要参与了B细胞与免疫球蛋白介导的免疫反应、蛋白质的成熟与激活的调节等生物学过程。2.实验组与对照组2比较,共鉴定筛选到211个差异表达蛋白质,其中上调蛋白134个,下调蛋白77个。差异蛋白主要影响了多种细胞防御反应、DNA与染色质组装、对IFN-γ的反应、细胞分泌、多种负调控反应等生物学过程。结论:1.经TMT蛋白组学分析,实验组相较于对照组产生了明显的蛋白质上调及下调,证实了44℃温热刺激对传染性软疣组织细胞蛋白质谱的表达产生显著影响。2.在传染性软疣组织中,44℃温热刺激产生了调控传染性软疣病毒基因表达、增强角质形成细胞的防御能力及抗病毒能力、促进细胞免疫应答、影响细胞物质代谢等变化,这些变化可能是临床温热治疗传染性软疣的基础。
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