【摘 要】
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兔防御素(NP-1)具有广谱的微生物抗性,我们期望将NP-1基因导入玉米基因组中,使之能抗细菌、真菌与病毒病以期获得抗病性植株,探索NP-1基因在禾本科作物抗病育种中的应用,研究
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兔防御素(NP-1)具有广谱的微生物抗性,我们期望将NP-1基因导入玉米基因组中,使之能抗细菌、真菌与病毒病以期获得抗病性植株,探索NP-1基因在禾本科作物抗病育种中的应用,研究非植物来源防御素基因在提高植物抗病性方面的潜在应用价值.构建了植物表达载体pAct1NP1hygr,质粒中携带由水稻actin 1启动子驱动的兔防御素基因(NP-1)以及由CaMV 35S启动子驱动的潮霉素磷酸转移酶基因(hpt).限制性内切酶酶切鉴定证明载体构建正确,且兔防御素基因与潮霉素磷酸转移酶基因转录方向一致.将部分R0代转基因玉米种子种入温室土壤中,通过PCR检测技术、Southern杂交技术证实兔防御素基因已经稳定遗传至部分R1代玉米植株的基因组中.RNA点杂交检测和Northern杂交检测结果表明部分R1代转基因玉米中兔防御素基因能够进行正常转录.在R1代转基因玉米的5-7叶期接种玉米大斑病菌(Helminthosporium turcicum Pass)0号生理小种,玉米吐丝16天后观察植株的抗、感病情况.与对照植株相比,转兔防御素基因的玉米对玉米大斑病的抗病性显著增强,枯斑小而少,有的植株上无枯斑形成,对玉米大斑病具有免疫级抗病性.
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