巫山淫羊藿成分分析以及成分转化研究

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淫羊藿(Epimedium)是我国传统中药。具有“补肾阳、强筋骨、祛风湿”的传统功效。2015版《中华人民共和国药典》共记载了5种淫羊藿,分别为淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim)、箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum Maxim)、柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim)、朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)和巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)。其中,淫羊藿、箭叶淫羊藿、柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿由于药典质量控制成分为淫羊藿苷(含量大于0.50%)被分为一类。巫山淫羊藿由于其质量控制成分为朝藿定C(含量大于1%),而淫羊藿苷含量不足0.50%而被分为另一类。淫羊藿苷为淫羊藿属植物主要活性成分,具有多种药理作用,包括补肾、壮阳、祛风湿、抗心血管类疾病、抗糖尿病、抗癌等等。目前市面上淫羊藿植物的价格是与淫羊藿苷含量呈正相关的。巫山淫羊藿由于活性成分淫羊藿苷含量较低而存在着价格低、市场利用度低的情况。因此如何提高巫山淫羊藿中活性成分含量值得研究。本文以重庆市巫山县巫山淫羊藿作为研究对象,研究其主要成分,探究如何获得高含量淫羊藿苷的巫山淫羊藿。主要研究内容如下:(1)巫山淫羊藿主要成分与种植采收储存的研究。建立巫山淫羊藿分析方法研究巫山淫羊藿不同采收月份、不同药用部位、不同存储方式对主要成分朝藿定C含量、淫羊藿苷含量的影响。以巫山淫羊藿中淫羊藿苷含量为评价指标,结果表明,巫山淫羊藿最佳采收月份为9月,最佳用药部位为叶片,最佳储存方式为阴干。(2)巫山淫羊藿主要成分与加热温度时间的关系。淫羊藿中的主要成分黄酮糖苷含量受加热温度和加热时间影响。本文研究了巫山淫羊藿叶片分别在加热温度140,160,180°C,加热时间为10,30,50,70,90 min时其主要成分的含量变化。实验结果表明在同种温度下三糖苷朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的含量随着加热时间的增加而减少,二糖苷淫羊藿苷、单糖苷宝藿苷I含量随着加热时间的增加先增加后减少。在炮制条件为140°C,50,70 min;160°C,10,30,50 min以及180°C,10 min时,巫山淫羊藿叶片中中活性成分淫羊藿苷的百分含量均从一开始的0.33%增加到大于0.50%,高于药典标准。本文通过加热处理,得到了含有高含量淫羊藿苷的巫山淫羊藿叶片。(3)巫山淫羊藿主要成分与酶转化的研究。通过结构对比发现,巫山淫羊藿中高含量的朝藿定C较淫羊藿苷C-3位上多一个鼠李糖。本文采用α-L-鼠李糖苷酶对巫山淫羊藿朝藿定C对照品和巫山淫羊藿提取物进行了转化,在最适反应温度、最适pH条件下,朝藿定C转化成淫羊藿苷,转化率高于95%。巫山淫羊藿提取物中淫羊藿苷含量由3.50%变为14.63%。本文通过酶处理,得到了含有高含量淫羊藿苷的巫山淫羊藿提取物。本文从种植采收储存、炮制和酶转化方面研究了巫山淫羊藿中的成分变化,确定了巫山淫羊藿最佳种植采收储存条件,最佳炮制方法,最佳酶转化方法,获得了高含量淫羊藿苷的巫山淫羊藿提取物和巫山淫羊藿叶片,为进一步研究巫山淫羊藿的药用提供了基础。
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