儿童急性淋巴细胞白血病分层诊断和治疗相关因素的研究

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随着儿童急性淋巴细胞白血病诊断和治疗学的发展,儿童急性淋巴细胞白血病的无病生存率极大提高,已成为一可治愈性疾病。但由于白血病属一异质性疾病,采用同等的治疗方案,治疗结果却大不相同。一部分患儿,采用强烈化疗并不能取得理想的治疗效果,另一部分患儿,则不需要很强烈的化疗。因此需要对白血病患儿进行不同危险度分层,实行分层诊断与治疗。既增强疗效,同时亦可减少一部分患儿过分强烈化疗带来的第二肿瘤发生的风险以及远期生活质量的下降。目的(1)探讨融合基因的检测条件,建立稳定的检测方法,完善MICM分型诊断;(2)通过综合各危险因素,对患儿进行分组治疗,比较各组治疗效果,评价疗效;(3)建立骨髓MRD检测方法(4)观察早期治疗反应及骨髓MRD水平与预后的关系。方法(1)采用巢式RT-PCR方法,对骨髓标本进行单个核分离,提取RNA,进行反转录和PCR扩增,凝胶电泳后紫外灯下摄像,记录特异性条带;(2)根据各危险指标,确定危险度分层,分层化疗;(3)采用流式细胞术,联合应用单克隆抗体组合对细胞进行标记,发现异常表型细胞;(4)分析早期治疗反应及骨髓MRD水平,统计其与复发之间的关系。结果(1)巢式RT-PCR方法进行白血病病人融合基因检测,敏感性可达10-5左右,结果稳定可靠,可用于儿童急性淋巴细胞白血病的分层诊断,指导治疗;(2)BCR-ABL阳性ALL儿童预后较差,TEL-AML1阳性治疗反应好。(3)泼尼松诱导试验不良、第19天骨髓象为M2/M3患者复发率显著高于诱导试验良好、骨髓象为M1患儿组;(4)诱导治疗结束时骨髓MRD水平>1%组较<1%组复发率高。结论(1)成功建立巢式PCR方法进行白血病患儿融合基因检测方法。该方法快速、灵敏、简便、经济,结果可靠,为临床分层诊断与治疗提供可靠依据。(2)临床资料初步显示BCR-ABL阳性ALL患儿易复发, TEL-AML1阳性患儿治疗反应较好。(3)早期治疗反应不良与复发明显相关。(4)诱导治疗结束时骨髓MRD水平与复发率相关。
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