大豆异黄酮组合物的制备及其生物合成的初步研究

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本文利用有机溶剂萃取,大孔吸附树脂柱、氧化铝柱、硅胶柱等柱层析,并通过两次HPLC制备,得到了三种化合物纯品,经光谱解析,结构确认为大豆苷、黄豆苷和染料木苷。考查了精制大豆异黄酮组合物的制备工艺,并纯化得到了高纯度大豆异黄酮组合物,液相检测精制大豆异黄酮组合物中大豆苷、黄豆苷与染料木苷之和在95%以上。 建立了大豆异黄酮总苷含量测定方法,进行了方法学考查,结果证明该方法适用于大豆异黄酮总苷的含量测定。对精制大豆异黄酮组合物、不同豆类和大豆不同生长时期各组织的总异黄酮苷进行了含量测定。 根据文献报道的大豆异黄酮合成酶的蛋白和基因序列,用软件设计特异性引物,用RT—PCR方法从大豆幼苗中克隆了大豆异黄酮合成酶cDNA,该片断与文献报道完全一致,大小为1127bp。
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