慢乙肝患者肝细胞HBV cccDNA含量与肝细胞tDNA、HBsAg、HBcAg及其血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg的关系研究

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目的:探讨慢性乙肝患者肝细胞内HBV cccDNA含量与肝细胞内tDNA、HBsAg、HBcAg及血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg的关系以及其临床应用。方法:应用荧光定量聚合酶链反应法检测28例慢性乙型肝炎病人(乙肝组)、30例乙肝肝癌病人(肝癌组)、4例抗病毒治疗的慢乙肝病人(抗病毒组)、7例血清HBV标志物、HBV DNA均阴性的非乙肝病人(对照组)的肝细胞内HBV cccDNA、tDNA和血清HBV DNA含量,用ELISA法检测上述病人血清内HBsAg、HBeAg水平,免疫组化法定性检测肝组织内HBsAg、HBcAg,用spss 13.0软件统计分析肝细胞HBV cccDNA含量与肝细胞tDNA、HBsAg、HBcAg及血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg的关系。结果:(1)HBsAg、HBcAg在肝细胞的不同表达模式间肝细胞HBVcccDNA、HBV tDNA含量间没有显著性差别,p值分别为0.128,0.111。(2)肝细胞内HBV cccDNA含量与血清HBV DNA水平呈低度正相关,(r=0.387,p=0.003)。(3)肝细胞内HBV cccDNA含量与血清HBsAg水平呈低度正相关,(r=0.295,p=0.025),与血清里HBeAg水平无相关性,(r=0.125,p=0.254)。(4)肝细胞内HBV cccDNA含量与肝细胞内HBV tDNA含量高度正相关,(r=0.881,p=0.00)。(5)慢乙肝、肝癌癌旁和肝癌的肝细胞内HBV cccDNA含量之间没有显著差别,p=0.459。(6)4例抗病毒组病人,疗程>2年并达到《病毒性肝炎防治方案》规定停药标准,肝细胞内cccDNA、tDNA含量及血清HBsAg、HBeAg水平与未抗病毒组比较明显降低,但肝细胞内仍然可以检出HBV cccDNA、tDNA。结论:(1)肝细胞HBV cccDNA含量高低与HBsAg、HBcAg在肝细胞的表达模式关系没有一定规律性。(2)HBV病毒复制活跃时,肝细胞HBVcccDNA、tDNA、血清HBV DNA相应升高,当肝细胞cccDNA处于低转录状态,血清HBV DNA<10~3 copies/ml,肝细胞内仍可能检出低拷贝HBVcccDNA。(3)定量检测肝细胞内HBV cccDNA的临床意义及学术价值尚不能被肝细胞内HBV tDNA及血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg的检测所取代。(4)使用核苷类似药物抗病毒治疗达到乙肝防治指南停药标准,肝细胞内仍可能检出低拷贝HBV cccDNA:(5)长期(>2年)核苷类似物抗病毒治疗能够耗竭肝细胞HBV cccDNA。
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