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目的：建立同时检测甘草中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A的HPLC-FLD和LC-MS/MS测定方法；研究免疫亲和柱再利用的可行性；运用再利用的免疫亲和柱净化17种中药材，并用HPLC-FLD方法测定药材中黄曲霉毒素与赭曲霉毒素A的含量。 方法：（1）甘草经甲醇-水（80∶20）超声提取20min后，用免疫亲和柱净化和富集；以甲醇和0.5％的乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱，采用柱后在线光化学衍生，荧光检测器测定。黄曲霉毒素的检测波长为激发波长λex=360nm，发射波长λem=440nm；赭曲霉毒素A的检测波长为λex=333nm，发射波长λem=460nm。（2）甘草经甲醇-水（体积比为80∶20）超声提取后，AflaOchra HPLCTM免疫亲和柱净化和富集。以0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液为流动相,通过C18色谱柱梯度洗脱,采用电喷雾离子源,黄曲霉毒素采用正离子模式检测，赭曲霉毒素A采用负离子模式检测，内标法定量。（3）采用甲醇-水（80∶20）除去柱上吸附的杂质和变性的抗体，再用水淋洗柱子，最后用PBS缓冲液作为再生液淋洗以及填充柱子。17种中药材经甲醇-水（80∶20）超声提取后，用2%吐温-20/PBS溶液进行稀释，过再生后的免疫亲和柱，用水洗去杂质，再用甲醇洗脱毒素；以甲醇和0.5%的乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，用光化学衍生，荧光检测器测定。 结果：（1）本研究建立了免疫亲和柱净化-在线柱后光化学衍生HPLC-FLD同时测定甘草中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A含量的检测方法。结果表明黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1和赭曲霉毒素A的检测限分别为0.02、0.06、0.015、0.03、0.25μg/kg；黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1和赭曲霉毒素A分别在0.075~30.0ng/ml，0.25~100ng/ml，0.075~30.0ng/ml，0.25~100ng/ml，1.0~100ng/ml范围内的线性相关系数大于0.999；平均加标回收率为76.0%~103.1%，相对标准偏差（RSD）低于12.7%。（2）建立了LC-MS/MS法同时测定甘草中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A含量的方法。结果表明黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1和赭曲霉毒素A的检测限分别为0.005、0.003、0.005、0.007、0.003μg/kg；黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1和赭曲霉毒素A分别在0.015~6.0ng/ml，0.01~20ng/ml，0.015~6.0ng/ml，0.02~20ng/ml，0.01~20ng/ml范围内的线性相关系数大于0.996；平均加标回收率为72.7%~126.4%，相对标准偏差（RSD）低于20%。（3）免疫亲和柱的再生及重复使用研究结果表明，免疫亲和柱经再生后至少可重复利用一次，回收率达到检测要求。采用再利用的免疫亲和柱净化并测定了17种中药中的黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A的含量；经用枸杞子、苦杏仁、干姜对该检测方法进行考察，结果显示枸杞子的黄曲霉毒素与赭曲霉毒素 A的平均加标回收率为72.1%~105.7%，RSD低于13.3%；苦杏仁的黄曲霉毒素与赭曲霉毒素A的平均加标回收率为76.5%~95.0%，RSD低于7.8%；干姜的黄曲霉毒素与赭曲霉毒素 A的平均加标回收率为62.3%~98.0%，RSD低于11.5%，均符合美国官方分析化学师协会和欧盟的相关规定。 结论：本实验建立的同时检测甘草中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A的HPLC-FLD和LC-MS/MS方法灵敏度高、简便快速，可作为甘草中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A含量的测定方法。免疫亲和柱的重复利用研究结果表明，免疫亲和柱经再生后至少可重复利用一次，从而可节约检测成本。