研究背景:骨生成诱导因子（osteoglycin,OGN）是一种细胞外基质蛋白多糖,参与骨异位生成,以及肿瘤的发生和转移。近年来发现OGN基因表达与心脏肥大相关,提示该基因可能参与心血管功能调节,但其是否参与血管新生,相关研究尚属空白。研究目的:明确OGN是否参与缺血后血管新生,探索其可能的机制。研究方法和结果:收集下肢动脉疾病接受截肢手术的患者（n=3）和无下肢缺血病史的对照患者（n=2）的腓肠肌石蜡切片进行内皮细胞标志物CD31和OGN免疫荧光染色,发现OGN在下肢缺血患者肌间内皮细胞的表达较对照患者肢体的肌间内皮细胞表达明显下调,提示OGN表达可能涉及局部缺血。制备小鼠下肢缺血动物模型,取术后7天的下肢腓肠肌进行免疫组化及蛋白定量分析,发现下肢缺血组OGN表达较对照组明显下调。为明确OGN的下调是否具有调节血管新生的功能,以OGN敲除（knockout,KO）小鼠为研究对象,建立股动脉结扎的下肢缺血模型。激光多普勒提示OGN KO小鼠的血流恢复速度和程度均高于野生型（wild type,WT）小鼠,且免疫组化染色提示OGN KO小鼠腓肠肌中毛细血管密度也高于WT小鼠。但OGN KO小鼠和WT小鼠的组织坏死和炎症细胞浸润程度并无差异。分别取KO小鼠和WT的主动脉环培养,发现KO小鼠的主动脉环中有更多的内皮细胞出芽。培养人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vascular Endothelial Cells,HUVECs）,并转染干扰OGN表达的小RNA（small interfering RNA,siRNA）,对照组转染阴性对照小RNA（Negative Control,NC）,发现转染OGN siRNA的细胞体外Matrigel成管、增殖、迁徙的能力均高于NC组细胞。虽然OGN siRNA组和NC组在VEGF和VEGF2型受体（VEGF receptor 2）的蛋白表达水平上并没有差异。但在血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）的刺激下,转染OGN siRNA的细胞成血管通路的磷酸化程度和时间都更高。免疫共沉淀提示OGN在体内和体外均分别与VEGFR2相结合。并且,VEGF刺激可减少OGN和VEGFR2的结合;而OGN的低表达则促进了VEGF与VEGFR2的结合。另外,本研究发现,与NC相比,转染OGN siRNA的细胞中活性氧水平更高;NADPH氧化酶（NADPH oxidases,NOXs）水平,特别是NOX1和NOX4的表达水平更高。OGN KO小鼠缺血肢体中的NOX1和NOX4水平也高于WT小鼠。使用NOX广谱抑制剂apocynin,可抑制OGN低表达引起的体外Matrigel成管增加。研究结论:OGN下调有促血管新生作用,其机制可能与OGN与VEGFR2结合减少有关;同时OGN低表达时内皮细胞NOX家族表达升高,氧化应激增加也可起到促进血管新生的作用。