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目的:种子细胞是制约半月板组织工程进一步临床应用的首要因素,也是保证组织工程可持续深入研究的前提条件。目前用于半月板组织工程的种子细胞主要有间充质干细胞、多能纤维细胞、半月板纤维软骨细胞及转基因细胞等;骺板(又称生长板)是位于长骨骺与干骺端之间的具有纵向生长能力的透明软骨。胚胎干细胞经过增殖形成软骨支架,再进一步分化为关节软骨、半月板及骺板,三种软骨具有共同的细胞发生来源。本实验的目的是:比较培养骺板软骨和半月板软骨细胞的生物学特性,探讨培养骺板软骨细胞作为半月板组织工程种子细胞的可行性。方法:分别自4周龄新西兰大白兔骺板和半月板分离软骨细胞,行单层传代培养,取第1代细胞行无支架离心管培养,倒置相差显微镜下动态观察两种细胞的生物学特性,比较骺板软骨细胞和半月板软骨细胞的生长曲线,透射电镜观察比较第2、4代骺板软骨细胞及半月板软骨细胞的超微结构,另取6周龄新西兰大白兔股骨远端关节软骨、胫骨近端骺板及半月板,与离心管培养软骨一并行Ⅱ型胶原免疫组化染色、甲苯胺蓝染色、藩红“0”染色等组织学观察,以及透射电镜观察比较四种软骨细胞的超微结构。结果:第4代骺板软骨细胞以及半月板软骨细胞出现去分化,似成纤维细胞;离心管培养第1代骺板软骨细胞能形成软骨,而半月板软骨细胞则不能。离心管培养形成的软骨有独特的超微结构,与关节软骨及骺板有一定的相似性,而与半月板有明显区别。四种软骨各自有不同的细胞和细胞外基质特征。第2代骺板软骨细胞与第2代半月板软骨细胞以及第4代骺板软骨细胞与第4代半月板软骨细胞都有不同的细胞超微结构。结论:半月板来源的软骨细胞经离心管培养不能形成软骨组织,离心管培养第1代骺板软骨细胞能形成软骨,且有独特的超微结构,可能作为关节软骨与骺板的移植物,不能作为半月板的移植物。随着传代次数的增加,至第4代骺板软骨细胞以及半月板软骨细胞均出现去分化现象,逐渐失去软骨细胞的特异性表型。由本实验可见,兔骺板软骨细胞不能作为半月板组织工程的种子细胞。