甜瓜单性花性状遗传规律及分子标记研究

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甜瓜(Cucumis melo L.)具有显著的杂种优势,生产上几乎全部使用甜瓜一代杂交品种。利用单性花系进行杂交种子生产,不但可省去杂交授粉过程中人工去雄的繁杂工序,降低制种成本,还可提高甜瓜一代杂交种子纯度,因此是一代杂交种制种的有效途径。本研究以西北农林科技大学园艺学院西甜瓜课题组选育得到两个甜瓜单性花系ATA-A、ATA-B、普通的雄全同株(雄花、两性花同株)甜瓜品种以及他们的杂交后代为材料,对单性花性状的遗传规律进行了研究,同时对甜瓜的RAPD-PCR反应体系进行了优化,利用获得的优化体系对控制单性花的基因进行了分子标记。取得了以下结果:1.通过对甜瓜单性花系ATA-A、ATA-B及他们的杂交后代F1、F2、BC1的花性型分离情况进行统计分析研究后认为,甜瓜单性花性状由一对基因控制的质量性状,单性花性状由显性基因所控制,其遗传符合孟德尔遗传规律。2.在进行优化RAPD反应体系研究中,以甜瓜基因组总DNA为模板,通过对聚合酶链式反应(PCR)体系中Mg2+浓度、dNTPs浓度、模板DNA的浓度、随机引物的浓度和Taq酶浓度梯度进行试验,结果表明,25μL反应体系中:10mM反应buffer 2.5μL, 2.0mM的Mg2+浓度,0.2mmol/L的dNTP,引物终浓度0.2μmol/L,30ng模板DNA,Taq酶1.0 U。筛选出的PCR反应体系扩增谱带清晰、条带丰富、重复性好。对反应程序进行单因子优化实验,获得了稳定的RAPD反应体系。3.以甜瓜单性花系ATA-A系与两性花品种YJX-1的杂交F2代的80个单株为材料,利用群分法(BSA法)进行单性花基因有关RAPD分子标记研究,筛选分析了840个10bp随机引物的PCR扩增谱带,结果表明,随机引物S128在1180bp,S493在930bp处产生与性别相关的特异性条带,S128的特异条带与单性花性状相关,S493的特异条带与两性花性状相关。4.对S128.1180标记的特异条带进行回收、克隆、测序,获得了特异条带的序列,为最终转化SCAR打下基础。
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