海葵具有药用价值,近年来也逐渐成为餐桌上的菜肴。海葵作为海洋天然产物研究热点之一,已被证实具有多种功效。本课题旨在为海葵产品的开发利用提供理论依据,首先概述了海葵的多种化学活性物质及其多糖的研究概况;采用国际标准或国标方法测定了海葵中的营养成分、非挥发性风味成分,并进行分析评价;采用水提醇沉法提取海葵多糖,利用响应面法确定海葵多糖提取的最佳工艺条件;采用DEAE-52纤维素离子交换柱和Sephadex G-100凝胶柱逐步对海葵多糖进行分离纯化;探究海葵多糖的免疫调节作用及细胞毒作用。本课题系统测定了中华仙影海葵的营养成分和非挥发性风味成分,其干物质中蛋白质、脂肪、灰分和多糖含量分别为390、50、167、260 g/kg,脂肪酸为7.5g/kg,氨基酸为277.9 g/kg。氨基酸种类齐全,根据世界卫生组织所颁布的标准,必需氨基酸含量满足成人每日所需(除亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸外)。矿物质元素种类丰富,富含钙(3650 mg/kg)、镁(10900 mg/kg)、硒(6.48 mg/kg)等元素。中华仙影海葵中的主要呈味氨基酸为谷氨酸和精氨酸,呈味核苷酸按照味道强度值(TAV)由高到低依次为GMP、IMP和AMP,味精当量为1.05 g MSG/100 g。结果表明中华仙影海葵营养丰富、味道鲜美。采用水提醇沉法提取海葵多糖,通过单因素试验确定了响应面试验的料液比、提取时间、温度三因素及其三水平,运用Box-Behnken软件设计了17组实验,并建立二元回归方程模型,以确定海葵多糖的最佳提取工艺条件。结果表明,多糖提取时料液比、提取时间、温度及其交互项对提取率有显著的影响,并通过验证实验得到的确定海葵多糖提取最优工艺条件为:料液比80:1、水浴温度72℃、提取时间3 h,此条件下的多糖得率为23.53%。中华仙影海葵粗多糖通过三氯乙酸法除蛋白质后,采用柱层析法分离纯化海葵多糖,分别经过DEAE-52阴离子交换纤维素柱层析,用浓度为0~1.0 mol/L的NaCl溶液洗脱,得到不同电荷性质的两种组分CPS-I、CPS-II,经浓缩、透析、冷冻干燥处理后,进一步通过Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析,得到不同分子量的纯品海葵多糖CPSI-1、CPSII-2。建立LPS诱导巨噬细胞RAW264.7模型,利用Griess试剂测定海葵多糖CPSI-1抑制模型细胞炎症因子NO的释放量;并采用Alamar Blue试剂检测CPSI-1对巨噬细胞的毒作用。结果表明,与LPS刺激对照组相比,海葵多糖CPSI-1可以显著抑制模型细胞的NO释放量(P<0.01),并且CPSI-1的细胞毒性分级均在0和1级。因此,海葵多糖可以通过抑制巨噬细胞模型的NO分泌,产生免疫调节生物活性。