【摘 要】
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目的通过探讨纤维/脂肪祖细胞（FAP）在电针延缓废用性肌萎缩中作用,了解电针防治废用性肌萎缩的细胞学机制;通过诱导HO-1、抑制炎性小体NLRP3表达,观察小鼠骨骼肌湿重比、横截面积以及相关炎性分子的表达变化,进一步探讨电针延缓废用性肌萎缩的机制,为废用性肌萎缩的防治提供新途径。方法第一部分:30只雄性C57BL/6小鼠随机分电针组、对照组、正常组,10只/组,电针组和对照组小鼠采用尾悬吊方法建立
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目的通过探讨纤维/脂肪祖细胞（FAP）在电针延缓废用性肌萎缩中作用,了解电针防治废用性肌萎缩的细胞学机制;通过诱导HO-1、抑制炎性小体NLRP3表达,观察小鼠骨骼肌湿重比、横截面积以及相关炎性分子的表达变化,进一步探讨电针延缓废用性肌萎缩的机制,为废用性肌萎缩的防治提供新途径。方法第一部分:30只雄性C57BL/6小鼠随机分电针组、对照组、正常组,10只/组,电针组和对照组小鼠采用尾悬吊方法建立废用性肌萎缩实验模型,电针组在尾悬吊的同时给予电针刺激（频率20Hz,强度1m A,连续波,15min/次,1/日）,电针刺激的穴位为阳陵泉与足三里,连续治疗14天后三组分别取材胫前肌和腓肠肌,HE染色观察骨骼肌结构和肌纤维横截面积,免疫荧光染色观察FAP细胞数量及分布,Western Bolt检测PDGFR-α、GLI-1、VCAM-1蛋白表达,RT-q PCR检测Atrogin-1、Mu RF-1基因表达。第二部分:32只8周龄雄性小鼠分为HO干预组、HO拮抗组、对照组和正常组,每组8只,前三组采用尾悬吊方法以建立废用性肌萎缩模型,HO干预组在尾悬吊第一天给予小鼠腹腔注射10 mg/μL氯化血红素以诱导HO-1表达,隔日一次,HO拮抗组在HO干预组基础上同期给予腹腔注射10 mg/μl的Zn PP以拮抗HO-1表达,14天后分别取材,HE染色、肌肉体质量比观察肌肉容积变化,免疫印迹法检测胫前肌NLRP3、ASC、Caspase-1等蛋白表达。第三部分:8只小鼠按上述同法建立实验模型,左胫前肌给予NLRP3-RNAi慢病毒注射（慢病毒干预组）,右侧胫前肌注射慢病毒空载体（对照组）,注射后3天、14天分别取材,HE染色、肌肉体质量比观察肌肉容积变化,免疫印迹法检测胫前肌NLRP3、ASC、Caspase-1等蛋白表达,ELISA法检测胫前肌IL-1β、IL-18含量及氧化应激分子改变。结果第一部分:与对照组相比,电针组腓肠肌的湿重比和横截面积增加（P＜0.05）,胫前肌的湿重比和横截面积增加（P＜0.05）,Atrogin-1和Mu RF-1表达显著下降（P＜0.05）;与对照组对比,电针组PDGFR-α、GLI-1、VCAM-1表达升高（P＜0.05）。第二部分:与对照组相比,HO干预组肌肉萎缩较轻,炎性小体NLRP3及相关蛋白ASC、Caspase-1表达降低（P＜0.05）,HO拮抗组的NLRP3相关蛋白表达与对照组相比无明显差异。第三部分:与对照组相比,慢病毒注射14天小鼠肌肉萎缩程度较轻,NLRP3炎性小体相关蛋白表达降低（P＜0.05）,IL-1β、IL-18含量降低（P＜0.05）,肌组织氧化应激状态减轻（P＜0.05）。结论FAP在电针延缓废用性肌萎缩中扮演重要作用,电针延缓小鼠废用性肌萎缩的机制与其减少FAP数量、诱导内源性HO-1表达有关。诱导HO-1、抑制NLRP3炎性小体表达可延缓小鼠骨骼肌的废用性萎缩,进一步揭示电针延缓废用性肌萎缩的机制可能与其减少FAP数量、诱导HO-1、抑制炎性小体表达有关。诱导HO-1和（或）抑制炎性小体的表达,也许是防治废用性肌萎缩的新途径。
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