血浆游离DNA在遗传病和肿瘤诊断中的应用

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第一部分检测血浆TPEF基因甲基化异常诊断大肠癌目的:分析中国大肠癌患者TPEF基因启动子区甲基化状态,建立检测肿瘤患者外周血血浆中TPEF基因异常甲基化的方法,探讨早期非损伤性诊断大肠癌的可行性。方法:提取大肠癌患者组织及外周血血浆DNA,并采用甲基化特异性PCR技术分析TPEF基因甲基化状态。结果:32例大肠癌手术切除标本中,24例检测到TPEF基因甲基化,阳性率为75.0% (24/32);对应的阳性标本中,22例血浆中亦检测到甲基化异常,血浆检出率为68.8%(22/32)。结论:大肠癌患者外周血血浆DNA中TPEF基因甲基化为一频繁事件,可望成为肿瘤早期诊断的一个标志物。第二部分检测孕妇血浆DNA非损伤性产前诊断胎儿性别目的:建立一种可靠性强的非创伤性鉴别胎儿性别的方法。方法:根据Amelogenin基因第3内含子在X-Y染色体上6bp的差异,设计了两种方法,应用PCR技术扩增孕妇血浆游离DNA,凝胶电泳鉴定其基因型,从而判断胎儿性别。结果:应用方法1检测了32例妊娠7-20周的孕妇血浆DNA样本,所得结果与产后胎儿实际性别相比较,符合率96.88%。应用方法2检测了32例妊娠7--13
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