MicroRNA-466a-3p在小鼠变应性鼻炎中的作用及机制研究

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背景:变应性鼻炎是耳鼻咽喉头颈外科中的常见疾病。它是由IgE介导的免疫反应,以Th2相关的细胞因子分泌增加,鼻黏膜嗜酸性粒细胞和鼻腔分泌物增多为特征的变态反应性疾病。方法:本研究通过microRNA芯片技术筛选出变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中表达发生显著性改变的microRNA.利用网站对相关microRNA靶点进行预测,结合当前文献研究的进展着眼于在变应性小鼠鼻黏膜中表达下降的mir-466a-3p,探讨其在小鼠变应性鼻炎发病过程中对Thl/Th2细胞失衡的影响。利用双荧光素酶的方法验证网站预测的GATA3是否确实为mir-466a-3p的靶基因。利用mir-466a-3p模拟物在小鼠脾单个核细胞过表达mir-466a-3p,检测GATA3蛋白的表达变化。另外,通过构建mir-466a-3p的模拟物,尾静脉注射变应性鼻炎小鼠,检测小鼠变应性鼻炎相关指标的改变及GATA3蛋白的表达变化。结果:MicroRNA芯片结果发现,在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中部分microRNAs表达与正常小鼠差异显著。双荧光素酶报告系统证实GATA3为mir-466a-3p的靶基因,与网站预测的结果相符。同时,体外实验发现mir-466a-3p的表达增加可以抑制GATA3蛋白的表达;体内实验也发现给予变应性鼻炎小鼠mir-466a-3p模拟物后使该microRNA表达趋于正常,可以使GATA3蛋白的表达水平较变应性鼻炎组下调,从而起到调节Thl/Th2细胞的平衡,缓解变应性鼻炎症状,达到治疗变应性鼻炎的作用。结论:本研究探究了microRNAs在变应性鼻炎发病中的作用,为其发病机制的研究提供全新的视角,为以mir-466a-3p作为分子靶点的变应性鼻炎的治疗奠定理论依据和实验参考,具有一定的理论与实践意义。
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