安泰口服液对荷瘤小鼠生存质量和急毒实验研究

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目的:恶性肿瘤是目前危害人类健康的重大疾病之一,其发病率呈逐年上升趋势。恶性肿瘤的隐匿性强,早期不易发现,癌症患者中约70%-8O%已是中晚期,大多数患者已失去早期手术根治的机会。西医三大主要治疗手段——手术、化疗、放疗,针对恶性肿瘤有较好的近期疗效,但是其毒副作用大,严重损伤了患者的正气。祖国医学在改善恶性肿瘤患者生存质量、延长其生存时间等方面具有独特的优势。本文通过检索相关数据库,根据导师多年来的临床经验常用方药,结合中国中医科学院中药研究所开发的“中医辅助传承系统”,研制出安泰口服液。为了寻求安泰口服液对小鼠生存期、抑瘤率的影响,以及其急性毒性反应,本实验给予S180荷瘤小鼠安泰口服液、贞芪扶正颗粒、环磷酰胺,以观察各组动物的一般状态、生存期、抑瘤率、及免疫器官脾脏、胸腺质量及安全性。材料与方法:1.材料:健康昆明种小鼠,雌雄各半,体重18~22g,S180瘤株,安泰口服液(补骨脂薏苡仁黄芪白术半夏陈皮茯苓等)、环磷酰胺、贞芪扶正颗粒、生理盐水、MODEL DS-671型电子秤。2.方法:2.1造模:将已接种7天肿瘤生长良好的S180腹水型小鼠抽吸乳白色浓稠的腹水,与生理盐水按1:3的比例进行稀释,并用血球计数板计数肿瘤细胞,调整肿瘤细胞数为1×107个/ml,制成肿瘤细胞悬液。瘤株接种前,均用0.2%台盼蓝染色,计数活肿瘤细胞率>95%。在小鼠右前腋下皮下注射0.2mlS180细胞悬液(约2×106个细胞),制成S180实体瘤模型。接种共计40只。2.2安泰口服液对荷瘤小鼠生存期影响实验:动物随机分成4组,每组10只,雌雄各半。分别为:安泰口服液组、贞芪扶正颗粒组、环磷酰胺组、模型对照组。安泰口服液组荷瘤小鼠给予0.4ml/(只·日)灌胃给药,贞芪扶正颗粒组荷瘤小鼠给予0.4ml/(只·日)灌胃给药,环磷酰胺组荷瘤小鼠腹腔注射环磷酰胺(20mg/kg·日),模型对照组:生理盐水灌胃0.4ml/(只·日)。以上各组均在接种肿瘤后第2天开始给药,每日1次。为保证给药量不对小鼠的胃部造成损伤,灌胃给药前禁食及禁水2小时。每日称取小鼠体重,观察毛色、活动度、进食量,直至死亡前一日,计算增重比。以肿瘤接种之日算起至模型对照组小鼠全部死亡结束实验,记录死亡时间,计算生存期延长率。生存期延长率=(给药组平均生存天数-模型对照组平均生存天数)/模型对照组平均生存天数×100%2.3安泰口服液对荷瘤小鼠肿瘤生长抑制作用实验:分组给药同实验一。实验第12天给药结束24小时后,称取所有小鼠体重,随后处死,迅速剥离肿瘤称取其重量,计算抑瘤率。抑瘤率=(模型对照组肿瘤重量-给药组肿瘤重量)/模型对照组肿瘤重量×100%。解剖取出脾脏、胸腺,去除掉脂肪组织,使用电子秤称其重量,并计算脾脏指数和胸腺指数。脾脏指数=脾脏重量/小鼠体重(mg/g),胸腺指数=胸腺重量/小鼠体重(mg/g)。2.4安泰口服液对荷瘤小鼠的急性毒性实验:健康昆明种小鼠40只,随机分为2组,雌雄各半。安泰口服液灌胃组:以安泰口服液可供小鼠灌胃的最大浓度(4.9g/ml),一次灌胃0.4ml/10g体重,连续3次,中间间隔4小时。灌胃前禁食不禁水12小时,间隔期间不供食。对照组:灌胃等量饮用水,剩余同给药组。给药后,饲养1周,观察小鼠的毛发、活动度、饮食、二便及死亡情况。在实验第8天处死小鼠,解剖观察其心、肝、脾、肺、肾等主要脏器的组织变化。结果:1.安泰口服液对荷瘤小鼠生存期影响实验,与模型对照组比较,安泰口服液、贞芪扶正颗粒以及环磷酰胺可显著延长荷瘤小鼠生存期,生存期延长率分别为51.67%、32.78%、27.45%,有显著性差异(P<0.05)。2.安泰口服液对荷瘤小鼠肿瘤生长抑制作用实验,安泰口服液可以抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,提高荷瘤小鼠的胸腺及脾脏的重量,与模型对照组相比,安泰口服液、贞芪扶正颗粒、环磷酰胺均有抑制肿瘤生长的作用,抑瘤率分别为38.3%、32.5%、81.7%。与模型对照组相比,安泰口服液组、贞芪扶正颗粒组以及环磷酰胺组有显著性差异(P<0.05)。安泰口服液和贞芪扶正颗粒均可以增加荷瘤小鼠胸腺和脾脏的质量胸腺指数和脾脏指数分别为1.71±0.45、1.43±0.48和5.58±0.68、5.23±0.96,增强荷瘤小鼠的非特异性免疫功能。3.安泰口服液对荷瘤小鼠急性毒性反应实验,安泰口服液急性毒性很小,通过灌胃给药无法测出小鼠的半数致死量(LD50),小鼠的活动度、毛发、饮水、二便等与对照组相比无异常。结论:1.安泰口服液可以显著延长荷瘤小鼠的生存期。2.安泰口服液可以抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,通过增加胸腺重量等提高免疫功能。3.安泰口服液毒性较低,通过灌胃给药无法测出小鼠的半数致死量(LD50),证明其安全性较好。
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