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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)又称呕吐毒素,是广泛存在于玉米、小麦和大米等粮食作物中的真菌毒素之一。DON因具有免疫毒性、细胞毒性和生殖毒性,经口摄入或皮肤接触将严重威胁动物或人类健康。DON污染造成的全球性食品质量安全问题备受关注。因此,亟需建立可用于大批量样本快速筛查的检测方法。本研究基于合成的免疫抗原制备抗DON单克隆抗体,分别建立了胶体金(Colloidal gold nanoparticles,GNPs)和菊花金(Chrysanthemum-like gold@polydopamine,AuNC@PDA)免疫层析法(Immunochromatography assays,ICAs),用于小麦和大米中DON的定性和定量检测。主要研究方法和结论如下:(1)合成了5种DON免疫抗原和1种DON检测抗原。使用5种免疫抗原对小鼠进行免疫,第5次免疫后经酶联免疫吸附法筛选得到4只阳性较高、抑制率较好的小鼠,将4只小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合。对杂交瘤细胞培养上清液进行评价,1号、3号和4号小鼠未成功筛选到阳性细胞孔,2号小鼠成功筛选到2个阳性细胞孔(分别命名为4H4和5H4),在DON浓度为200ng/mL时的抑制率分别为41.2%和35.8%。对这2个孔中的细胞进行亚克隆,经细胞培养上清液评价,阳性细胞孔丢失,未成功获得抗DON单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)。(2)建立了一种胶体金免疫层析法(Colloidal gold immunochromatography assay,CG-ICA)用于定性和定量检测小麦和大米中的DON。通过柠檬酸钠还原法合成了GNPs。对抗体偶联pH、mAb用量、DON-BSA浓度、羊抗鼠抗体浓度以及GNPs-mAb喷量等参数进行了优化,在最优条件下建立了CG-ICA。CG-ICA定性检测小麦和大米中的DON时,定性检测限(Limit of detection,LOD)为1000.0μg/kg,方法的稳定性和检测性能较好。CG-ICA定量检测小麦和大米中DON时,线性方程分别为Y=5.148-1.357 lgX和Y=6.142-1.611 lgX,线性相关系数(Correlation coefficient,R~2)分别为0.991和0.989,定量LOD分别为75.688和65.661μg/kg,线性范围分别为150.0-3000.0和150.0-4500.0μg/kg。CG-ICA在小麦和大米样本中的加标回收率分别在69.4%-91.9%和94.1%-101.6%之间,批内变异系数(Coefficient of variation,CV)分别在10.9%-12.9%和8.7%-11.2%之间,批间CV分别在8.0%-15.3%和7.1%-9.4%之间,CG-ICA经加速老化后检测DON的CV小于10.2%。本方法的检测限较低、稳定性较高,可用于现场大批量样本的快速筛查。(3)建立了一种菊花金免疫层析法(Chrysanthemum-like gold@polydopamine immunochromatography assay,AuNC@PDA-ICA)用于定性和定量检测小麦和大米中的DON。通过一步法合成了菊花金。对抗体偶联pH、mAb用量、DON-BSA浓度、羊抗鼠抗体浓度以及AuNC@PDA-mAb喷量等参数进行了优化,在最优条件下建立了AuNC@PDA-ICA。AuNC@PDA-ICA定性检测小麦和大米中DON时,定性检测限为1000.0μg/kg,方法的稳定性和检测性能较好。AuNC@PDA-ICA定量检测小麦和大米中DON时,线性方程分别为Y=4.987-1.305 lgX和Y=4.229-1.095 lgX,R~2分别为0.999和0.996,定量LOD分别为110.524和105.986μg/kg,线性范围分别为150.0-3000.0和300.0-4500.0μg/kg。AuNC@PDA-ICA在小麦和大米样本中的加标回收率分别在71.1%-89.7%和93.5%-99.6%之间,批内CV分别在6.7%-9.1%和2.8%-7.3%之间,批间CV分别在4.1%-9.2%和3.1%-8.8%之间。AuNC@PDA-ICA经加速老化后检测DON的CV小于4.1%。本方法的检测限较低、稳定性较高,可用于现场大批量样本的快速筛查。综上所述,本研究建立了CG-ICA和AuNC@PDA-ICA,在20 min内均可完成样本前处理及检测过程,其定性和定量检测限满足我国《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》(GB 2761-2017)对小麦等食品中DON的限量要求。两种免疫层析方法在实际样本中的检测限较低、稳定性较高,适用于现场大批量样本的快速筛查,为我国粮食监管部门、市场监督管理部门和企业等提供有效的快速监测及筛查手段,为我国粮食质量安全提供保障。