【摘 要】
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以大麦黄矮病毒(BYDV)GAV株系的总RNA为模板,通过反转录和PCR扩增获得了开放阅读框ORF1-5的基因片段.将其克隆到pGEM-7zf(+)上,得到含有完整的ORF1-5的重组质粒pGORF1、pGORF
【出 处】
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中国农业科学研究院 中国农业科学院
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以大麦黄矮病毒(BYDV)GAV株系的总RNA为模板,通过反转录和PCR扩增获得了开放阅读框ORF1-5的基因片段.将其克隆到pGEM-7zf(+)上,得到含有完整的ORF1-5的重组质粒pGORF1、pGORF2、pGORF3、pGORF5a、pGORF5b、pGORF5.DNA序列分析结果表明,BYDV GAV ORF1及其前面的非编码序列全长1124nt,与BYDV MAV-PS1(P.P.Ueng,1992)相比缺失了一个核苷酸,其核苷酸序列和由此堆导的氨基酸序列同源性分别为89.5%和93.5%;ORF2及其后面的非编码序列全长1711nt,与BYDV MAV-PS1相比缺失了四个核苷酸,其核苷酸序列和由此推导的氨基酸序列同源性分别为92.2%和96.6%;ORF3全长600nt,与BYDV MAV-PS1相比,其核苷酸序列和由此推导的氨基酸序列同源性分别为97.5%和96.5%;ORF5全长1377nt,与BYDV MAV PS-1相比,其核苷酸序列和由此推导的氨基酸序列同源性分别为87.4%和87.1%.构建了ORF5(通读蛋白)在植物中的表达载体ppORF5,并采用花粉管通道法对小麦进行了转化.
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