目的:近年来，我国前列腺癌的发病率和病死率也在呈上升趋势。该病的早期可手术治疗。因为肿瘤的发展依赖于雄激素的存在，对于错失手术时机多数患者可行雄激素阻断治疗，但随着治疗时间的延长，肿瘤往往转变为激素抵抗型前列腺癌(hormone-refractoryprostatecancer,HRPC)。因此继续开发一种能有效地控制肿瘤生长，改善患者症状的药物具有重要的意义。小白菊内酯(panhenolide，PTL)是从中草药艾菊中提取的，属于倍半萜稀内酯类化合物，在一些西方国家，早年间已被提纯并用于消炎镇痛之用。一般被用于治疗关节炎、头痛、偏头痛及感冒发热等，随着国内外学者对小白菊的深入研究，现已证实小白菊内酯在体内外对多种肿瘤细胞具有明显的抑制效果，如乳腺癌、胃癌及肝癌等多种肿瘤。近几年国外一些研究表明PTL可能对前列腺癌有一定作用，但研究较少，且浮于表面，具体作用大小及机制尚不清楚，因此本实验通过观察PTL对体外培养的人雄激素非依赖性前列腺癌DU-145细胞的增殖、凋亡的影响并探讨其作用机制，旨在为前列腺癌的辅助治疗及PTL的临床应用提供实验依据。　　 方法:　　 1.细胞培养　　 体外细胞传代培养人前列腺癌DU-145细胞。待细胞对数生长期，大约生长至70％时，进行药物刺激。实验组细胞给予不同浓度的PTL处理，对照组细胞给予生理盐水处理。　　 2.细胞增殖分析　　 分别应用MTT法和及细胞计数法对细胞增殖分析。以测定检测各浓度、时间点细胞的吸光度OD值，推算抑制率，评估PTL是否影响DU-145细胞增殖。　　 3.流式细胞学分析　　 取敏感浓度，以浓度梯度分组处理各组细胞后，消化制备成单细胞悬液，然后经过经固定、洗涤及染色等过程后，用流式细胞学分析PTL对DU-145细胞周期分布和凋亡的影响。　　 4.免疫细胞化学染色　　 将细胞接种于玻片上，用PTL处理48h后，取出玻片将各组细胞固定。用TritonX-100处理玻片，封闭后一抗及二抗结合反应，然后通过DAB显色后光镜下计数阳性细胞数并计算其所占比例，检测KI67蛋白表达率。　　 5.Western印迹分析　　 取等量细胞总蛋白，加样与SDS聚丙烯酰胺凝胶经过电泳、电转膜，封闭、一抗及二抗结合、化学发光等过程，然后对Cleaved-caspase3、Bcl-2和Bax蛋白进行检测。　　 结果:　　 1.PTL抑制DU-145细胞增殖　　 MTT和细胞计数分析显示，PTL可以明显抑制DU-145细胞增殖，具有明显的时间和浓度依赖性，呈明显的正相关性(P＜0.05)。免疫细胞化学染色结果表明，PTL处理DU-145细胞后增殖标志物KI67蛋白表达降低，与浓度呈负相关性(P＜0.05)。　　 2.PTL促进DU-145细胞凋亡　　 流式细胞学结果表明，PTL促进DU-145细胞阻滞于G0/G1期(P＜0.01)，并诱导DU-145细胞出现明显的凋亡峰(P＜0.05)。Western印迹结果表明PTL处理DU-145细胞后增殖凋亡标志物Cleaved-caspase3表达增加，与浓度呈正相关性(P＜0.01)。Western印迹结果表明在PTL处理DU-145细胞后促凋亡蛋白Bax表达水平明显升高，与浓度呈正相关性(P＜0.05)，而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平明显降低，与浓度呈负相关性(P＜0.01)。　　 结论:　　 1.小白菊内酯可明显抑制人前列腺癌DU-145细胞的增值，且呈明显的时间、剂量依赖性，可能与下调KI67蛋白表达有关。　　 2.小白菊内酯对人前列腺癌DU-145细胞的细胞周期有一定影响。随着药物浓度的增小大，DU-145细胞G0/G1期细胞数明显增多，S和G2/M期细胞数减少，细胞周期阻滞于G0/G1期。　　 3.小白菊内酯可以有效诱导人前列腺癌DU-145细胞凋亡，呈时间、剂量依赖性。凋亡可能与上调人前列腺癌DU-145细胞中Cleaved-caspase3的表达有关。　　 4.上调Bax和下调Bcl-2表达水平可能是小白菊内酯诱导DU-145细胞凋亡的机制之一。