【摘 要】
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目的建立并评估基于微流控芯片（MC）技术检测布鲁氏菌（简称布氏菌）核酸的方法,以提高布鲁氏病（简称布病）的诊断能力,为后续防治布病提供基础理论指导。方法设计MC核酸提取、PCR和DNA反向斑点杂交相结合的检测布氏菌DNA的全自动技术流程。比较MC法与离心柱法、磁珠法及手工法提取布氏菌核酸效率;设计微流控全自动核酸检测（MC-PCR）与基因测序符合性测试、以及实时荧光定量核酸扩增检测（q PCR）、
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目的建立并评估基于微流控芯片（MC）技术检测布鲁氏菌（简称布氏菌）核酸的方法,以提高布鲁氏病（简称布病）的诊断能力,为后续防治布病提供基础理论指导。方法设计MC核酸提取、PCR和DNA反向斑点杂交相结合的检测布氏菌DNA的全自动技术流程。比较MC法与离心柱法、磁珠法及手工法提取布氏菌核酸效率;设计微流控全自动核酸检测（MC-PCR）与基因测序符合性测试、以及实时荧光定量核酸扩增检测（q PCR）、Taq Man探针法检测比较实验;评估MC-PCR法检测布氏菌的重复性、准确性、特异性、最低检出限。结果MC法提取布氏菌核酸在27个循环就达到设定的阈值,效率优于大多成品试剂盒,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;MC-PCR与基因测序Kappa值0.659、与q PCR Kappa值0.777,检测具有高度一致性;MC-PCR与基因测序、Taq Man探针法、q PCR检测阳性结果符合率为100%、100%和97.3%;准确性结果符合率为100%;特异性结果阴性率100%;重复性结果均可以检出布氏菌;检出限浓度为825 copies/m L时,经两两比较MC-PCR与Taq Man、QPCR不同检测方法之间检出率差异有统计学意义（P＜0.05）。结论MC-PCR检测布氏菌核酸的检测方法安全、快捷、及时、精准,可以应用于临床。这将提高布病诊断率,对布鲁氏菌病的防治起到重要作用。
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